组织培养技术在果树方面及应用.pdfVIP

干果研究进展(5) 组织培养技术在果树方面的应用 代丽1周宏宇2刘新云1刘孟军1‘ (I河北农业大学中国枣研究中心，保定071001；2河北农业大学科教兴农中心，保定071001) 摘要：本文主要就果树组织培养中主要应用的外植体材料、培养基类型、培养条件等主要影响 因素做简单介绍；并主要对该技术在果树种质资源保存和无毒苗培育等方面的应用进行了综述。 关键词：组织培养；果树；种质保存：脱毒；应用 组织培养技术是近代生物科学发展起来的一门最成熟也是应用最广泛的技术，是生物技 术的主要组成部分。该技术主要是在组培室中进行快繁脱毒和工厂化的规模生产。自从问世 以来，对农作物、蔬菜、果树、花卉以及药用植物的新品种培育、品种脱毒、提纯复壮、快 速无性繁殖及扩大种苗生产等各个方面均产生了划时代影响。本文主要就其在果树方面的应 用进行综述。 果树组织培养技术的研究，始于20世纪40年代。我国虽然起步较晚，但发展很快，已 在枣、核桃、苹果、葡萄等多个树种上开展了组培脱毒和苗木繁殖等工作。本文主要就果树 组织培养中的培养基类型、激素种类、外植体材料以及培养条件等方面作一简单介绍；并主 要对该技术在果树种质资源保存和无毒苗培育等方面的应用进行综述。 1果树的组织培养 果树的组织培养材料是植株离体材料，称外植体。根据外植体的类型，可分为：用顶端 分生组织及其下的第l～2个叶原基切离培养的，称茎尖培养；以小段成熟枝条进行培养的， 称茎段培养；以叶片或叶鞘组织进行培养的，称叶片培养。利用组织培养方法繁殖果树植株 具有占地面积小、繁殖周期短、全年都能进行繁殖和繁殖系数高等特点；还可以消除果树的 某些病毒病，适应果树向品种更新快、矮化密植以及无病毒栽培方向发展的需要。 果树组织培养中主要应用方面包括外植体材料、培养基类型、生长调节剂种类和用量、 培养条件等。 培养基是外植体赖以生长和发育的基质。常用的培养基有含盐种类较少，盐量较低的 Ls及M等培养基。 White、Nitsch、Knop培养基；也有含盐种类较多，盐量较高的B5、B6、H 烟酸、肌醇等有机成分。培养基中加用6％一8％的琼脂做凝固剂。有些果树的培养还需加入一 些附加成分，如水解酪蛋白、植物激素。常用的植物激素有细胞分裂素：如激动素(KT)、 目；河北农业大学青年科学基因资助。 组织培养技术在果树方面的应用 201 培养基和激素种类各不相同，需要研究者根据具体情况进行摸索。 常用的外植体材料有茎尖、茎段和叶片等，一年四季都可取摘、接种，各季节的材料都 能分化、出苗。材料的种类和大小，因培养目的而不同，为脱除繁殖材料的病毒，一般取 0．1~0．2mm的茎尖；对一般繁殖材料，可取大茎尖或茎段培养，以提高分化率和分化速度。 外植体一般要经过两个灭菌过程，先用湿润剂处理使杀菌剂能很好渗入培养材料，如 70乡扣75％酒精，酒精兼有杀菌能力；再选择灭菌快而彻底，容易从材料上去除，并对接种材 料毒害作用小的药剂。 500-3000 接种后的繁殖材料一般要求置于25～30℃恒温和1 lx光照强度，每目光照14h的 条件下培养。当然需要特殊培养的材料可以根据需要适当变更培养条件。 盐类和生长素配成营养液，把生长到一定高度的组培苗基部浸于营养液中培养生根，也可用 固体培养基。生根培养的温度与扩繁期间基本相同，但光照强度一般要求在2000Ix以上。 2组织培养技术在果树上的应用 离体快繁是目前果树组织培养应用最多、最广泛和最有效的一个方面，对于脱毒苗、新 育成、新引进、稀缺良种、优良单株、濒危植物和基因工程植株等可通过离体快速繁殖，不 受地区、气候的影响，比常规方法快数万倍。 利用花药培养出花粉植株，可以加速后代纯合、快速组合多种性状、缩短育种进程、简 化育种程序。同时通过体细胞无性系变异、突变体选育、可培育出有利用价值的特殊品种和 材料。这些都表明果树组织培养应用于育种实践可以建立起新的育种系统，加速植物育种的 进程