一种蛋白-药物结合常数的测定方法.pdfVIP

西北大学学报(自然科学版) 2012年4月 ，第42卷第2期，Apr．，2012，Vo1．42，No．2 JournalofNo~hwestUniversity(NaturalScienceEdition) 一 种蛋 白一药物结合常数的测定方法 蒋玲玲，王超展，卫引茂 (西北大学 合成与天然分子化学教育部重点实验室／化学与材料科学学院，陕西 西安 710069) 摘要：目的 建立一种蛋白一药物结合常数的测定新方法。方法 以固定化牛血清白蛋白为固定 相，磷酸盐缓冲溶液为流动相，获得不同进样量下药物的液相色谱保留参数，以溶质进样量与保留 值的关系方程进行拟合，计算蛋白一药物结合常数(直接进样法)。结果 测定了咖啡酸(CA)，汉 黄芩素(WO)和木犀草素(Lu)3种药物与固定化牛血清白蛋白(BSA)在人体生理条件 (37oC，pH 7．40)下的结合常数，其数值高于竞争置换法，但与相关文献数据接近。结论 直接进样法可作为 一 种新方法用于研究蛋 白一药物的相互作用。 关 键 词：蛋 白一药物相互作用；直接进样法；前沿色谱法；竞争置换法 中图分类号：0657．7 文献标识码 ：A 文章编号：1000-274X(2012)02-0251-07 A methodtodetermineassociationconstantsofprotein-druginteraction JIANGLing—ling，WANGChao—zhan，WEIYin—mao (KeyLaboratoryofSyntheticandNaturalFunctionMoleculeChemistry ofMinistryofEducation， CollegeofChemistry＆MaterialsScience，NoahwestUniversity，Xian710069，China) Abstract：Aim A new methodwasestablishedtodeterminetheassociationconstantsofprotein—druginteraction． Methods Usingimmobilizedbovineseurm albumin (BSA)asstationaryphase，phosphatebufferasmobile phase，retentionparametersofdrugsinliquidchromatographywereobtainedindifferentinjectedamounts，andre- tenfionfactorswerefittedbytheequationdescribingtherelationshipbetweentheinjectedamountofsolutesandre— tentionfactorstocalculatetheassociationconstantsofprotein-druginteraction(directinjectedmethods)．Results ThepresentmethodwasusedtodetemrinetheassociationconstantsOfthreekindsofdurgs，caffeicacid(CA)， wogonin(wo)andluteolin(LU)，withimmobilizedbovineseurmalbumin(BSA)underhumanphysiological condition(37℃，pH7．40)，andtheobtainedassociationconstantswerehigherthanthosefromzonalelution，but closetothedatafromtherelatedliteratures．Conclusion Directinjectedmethodcanbeusedasanewmethodto investigateprotein-druginteraction． Keywords：protein—druginteraction；directinjectedmethod；frontalnaalysis；zonalelution 亲和色谱法 (AffinityChromatogra