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核型,异常核型占全部被检测的12%,提示产前诊断的重要性,本文检测的可导致新生儿智力或发育
的染色体异常胎儿49例,均在院内或院外终止妊娠,其中在院内引产的28例均在终止妊娠同时取胎儿
脐带血进行淋巴细胞培养,分析染色体核型,符合率100%。证实了羊水细胞核型分析的准确性。羊水
细胞培养及染色体核型分析是安全简便的产前诊断染色体疾病的有效方法。
由于羊水细胞大部分是衰老和固缩的脱落细胞,羊水细胞培养较其他组织培养更困难。传统的胰酶
消化法由于需要胰酶消化和多次离心,收获的细胞常有损耗,染色体分带清晰度欠佳,染色体核型常不
完整,从而使实验的成功率降低。这也加大了工作量,增加了中间环节和污染机会。由于羊膜腔穿刺是
有损伤性的取样技术,一旦失败,孕妇较难接受第二次取样,所以一次成功极为重要。
我们采用细胞瓶培养法并加以改良。换液后先用细胞刮刀分散细胞集落,有利于细胞快速均匀生
长,让细胞克隆生长得更多、中期分裂细胞更均匀。本方法成功率高,结果稳定,操作简便。在操作上
较酶消化法细胞丢失少,操作步骤少。本研究中785例的成功率达99%。通过细胞瓶培养得到足够分裂
象,每个病例可得到2~4张片子,每片可获得30~50个分裂较好的分裂象,使实验成功率大大提高。
本方法的培养时间短。本组病例中培养时间最短8d,最长13
d即可收获,一般8~10d即收获细
胞。在接种时接种面积小,细胞数量在相对面积中较密集,从而产生细胞群体效应。加快细胞贴壁生长
和增加细胞克降群,这样缩短培养时间。
总之,我们建立的改良原位培养方法操作简便,培养时问短,羊水细胞染色体核型多且完整,分散
均匀,分带清晰,出报告时间短。是一种简便、快速、成功率高的羊水细胞染色体制备方法,适合于推
广。
一183—
改良羊水细胞培养及染色体制备方法的探讨
作者: 龚护民, 陈宝江, 吴坚柱
作者单位: 龚护民(海南省海口市人民医院产科(570311)), 陈宝江,吴坚柱(广州中山大学附属第一医
院胎儿医学中心(510080))
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引用本文格式:龚护民.陈宝江.吴坚柱 改良羊水细胞培养及染色体制备方法的探讨[会议论文] 2007
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