拟南芥抗旱相关基因的表达载体构建及转基因植株鉴定.pdfVIP

第38卷 第2期 合肥 工 业 大 学 学报 (自然科学版) Vo1．38No．2 2015年 2月 JOURNAL0FHEFEIUNIVERSITYOFTECHNOLOGY Feb．2015 doi：10．3969／j．issn．1003—5060．2015．02．023 拟南芥抗旱相关基因的 表达载体构建及转基因植株鉴定 顾进宝， 阳立波， 曹树青 (合肥工业大学 生物与食品工程学院，安徽合肥 230009) 摘 要：文章以拟南芥Col一0植株的基因组 DNA和eDNA为模板扩增 出LWT2基因全长和 CDS片段，用 pEASY-BluntZeroCloningKit试剂盒连接至中间载体，转化到Transl-T1感受态细胞 内，通过单克隆挑选、 菌落聚合酶链式反应 (polymerasechainreaction，PCR)鉴定及质粒测序验证获得DNA阳性克隆。利用限制 性内切酶双酶切获得含有黏性末端的目的片段和载体片段，进