小鼠肝癌模型治疗方案.docVIP

肿瘤模型治疗方案 观察小鼠成瘤情况，当扪及接种皮下出现结节，并不断增长时，判断为模型成功。在接种后的第7-9天（瘤体体积约为0.05立方厘米），随即分为模型对照组，阳性对照组，低剂量组，中剂量组，高剂量组五个组，每组八只。禁食16h（前一天下午5点到次日上午9点），每只按0.1ml/10g灌胃给药（灌胃步骤见下页），每日给药一次，连续给药2周，总计给药14次。试验期间，每三天用游标卡尺测定肿瘤生长情况和记录体重变化。实验结束后，断椎处死小鼠，分离瘤体称重和测定体积。测量脾脏指数和胸腺指数（查查还可以检测什么指标，找容易做的） 实验组 注射剂量 次数 实验前体重 实验后体重 肿瘤大小（体积） 模型对照组 生理盐水0.1ml/10g 1次/天 阳性对照组 0.1ml/10g 同上 低剂量组 0.1ml/10g 同上 中剂量组 0.1ml/10g 同上 高剂量组 0.1ml/10g 同上 阳性对照组（5-FU）50mg/kg；低剂量组10mg/kg；中剂量组20mg/kg；高剂量组50mg/kg。每只小鼠灌胃剂量不超过0.1ml/10g。为了保证每只小鼠灌胃剂量的体积和浓度，可将不同剂量组的药物配成不同浓度。 结果：肿瘤体积计算公式：V=ab^2/2(V为体积，a为最长直径，b为最短直 径)。抑瘤率为：（对照组平均瘤重—实验组平均瘤重）∕对照组平均瘤重×100%。 总结:1.预测通过三个不同剂量组治疗后的肿瘤重量与对照组肿瘤重量有明显差异，说明黑麦酮酸D对于肝癌细胞有抑制作用；2.同时三个剂量组之间的差值说明黑麦酮酸D呈现剂量依赖性增强的特点，即一定范围内，用量越高，疗效越好；3.剂量组与阳性对照组之间的差值，可以反映出哪种药物治疗效果更好。 小鼠灌胃方法需要关注两点：一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线，方便灌胃针头进入，二是动作要轻柔，从口角进入，防止损失食道。 具体操作过程如下： ?. ?抓住小鼠，使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中，若一次抓的感觉不是很顺手，要放开重新抓，不要逞强进行下一步操作。?2. ?抓好小鼠就可以灌胃了，一般用1 ml的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入，压住舌头，抵住上颚，轻轻向内推进，进入食管后会有一个刺空感，进入食道后就可以推注药液了。（灌胃，不必要灌胃针头进入小鼠的胃部，进入食管后就可以推药了，这样对小鼠食道的损伤要小点，特别是要长期灌胃给药的情况下。）当然，灌胃针头也可以再往里面深入一点，防止药液从口中流出。?3. 灌胃容积一般是0.1～0.2 ml/10 g，最大0.35 ml/10 g，每只小鼠的灌胃最大容积不超过0.8 ml。经验总结? 1. ?在操作过程中最重要的是小鼠的固定。把小鼠放在笼子上，右手捏住它的尾巴，它会扒住笼子伸长身体，然后左手拇指和食指捏住它颈部皮肤（不用太用劲，保证它不能回头就行），其余三指抓住背部，就可以把它固定住了。注意头一定要固定好，头和躯体要保持一条直线，并且灌胃时使小鼠成竖直位，头向上。?2. ?把握要领，动作尽量迅速，减少小鼠的不适感。?. ?小鼠灌胃剂量：0.1 ml/10 g体重，也就是说，一只20 g的小鼠，一般一次灌胃0.2 ml。?. ?灌胃的方法与技巧对了，一般不会有问题。比如说抓小鼠的姿势（小鼠的身体最好伸展在一条直线上，不能让它乱动，要固定）；还有，一定要用灌胃针灌胃（灌胃针的针尖部分是弯曲的）；另外就是技巧上的问题了，进针时要从小鼠的嘴角进去，进去后让灌胃针顺着小鼠的上腭压着它的舌头进入食道，这当中会有种突破感，突破感过后就畅通无阻了，液体灌进去一点阻力也没有，若有阻力的话，那就说明你灌错地方了，取出灌胃针再来过，多练几次就熟练了，另外，灌胃的动作不能太粗鲁，一定要轻柔！ 6. ?20 g 的小鼠灌胃一天一次，只要操作得当不会被灌死。灌胃针可用12#注射器针头,磨平尖端,点焊为钝圆形。??7. ?操作前将灌胃针安在注射器上大致测量一下从口腔到胃内的位置(最后一根肋骨后缘)的长度,根据此距离确定插入深度,成年小鼠插入大约3厘米。成年小鼠每次最大可灌1.0毫升。?8. ?最重要的是手法,感觉和熟练程度。?固定好小鼠,身体最好伸展在一条直线，太松会动,太紧就把小鼠脖子勒住了。?一般沿口角进针，抵达咽部会有抵触感，小鼠会有吞咽动作，此时阻力丧失,就可继续下行了。