猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxⅡ基因无药物抗性标记突变株HBC-%27--%2fGFP-%27%2b-的构建和其生物学特性研究.pdfVIP

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌毒素apxlI基因无药物抗性 标记突变株HBC。／GFP+的构建及其生物学特性研究。 贝为成，何启盖，陈焕春，方六荣，肖少波，洪文洲，刘丽娜 华中农业大学动物医学院动物病毒室，湖北武汉430070 摘要：通过使用枯草芽胞杆菌蔗糖敏感基因sacB发展了一种依靠蔗糖的负向筛选系统，这种方 法允许没有标记突变的基因进入胸膜肺炎放线杆菌染色体。首先，构建了猪传染性胸膜肺炎放线杆 基因与亲本菌株胸膜肺炎放线杆菌HB染色体上野生型apxIICA基因发生同源交换，两步法筛选获 得了突变株HBC。／GFP+，PCR和southernblot对突变株进行初步鉴定，进一步对突变株的生物学特 性，包括溶血活性、免役原性、生长特性及其对小鼠的安全性进行了研究。结果表明，无药物抗性 标记突变株的构建是成功的．该突变株的成功构建为进一步研究突变株作为疫苗和载体奠定了基础。 关键词：胸膜肺炎放线杆菌；毒素apxH基因；负向选择；突变株HBCTGFP+ 猪传染性胸膜肺炎是由胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropn 严重危害养猪业的呼吸道疾病，该病以胸膜肺炎和出血性坏死肺