实验七 酶的特性.pptVIP

酶的特性 【目的要求】 加深对酶的性质的认识。 【基本原理】 本实验由温度对酶活力的影响；PH对酶活力的影响；酶的激活剂及抑制剂；酶的专一性4组实验组成。 （一）温度对酶活力的影响 酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为37-40℃，植物酶的最适温度为50-60℃。 酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显的改变，但在100℃的溶液中却很快地完全失去活性。低温能降低酶或抑制酶的活性，但不能使酶失活。 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色，糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色，在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。 （二）PH对酶活力的影响 酶的活力受环境PH值的影响极为显著。不同酶的最适PH不同。本实验观察PH对唾液淀粉酶活性的影响。唾液淀粉酶的最适PH约为6.8。 （三）唾液淀粉酶的活化及抑制 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响，氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。 酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。 （四）酶的专一性 淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。用Benedict试剂检查糖的还原性。 【实验用品】 1．材料： 2．器材和仪器：试管及试管架， 恒温水浴，冰浴，沸水浴，吸管，滴管，锥形瓶　 3．试剂： 　稀释30倍的唾液(用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释30倍。混匀备用。) KI－I2碘溶液(将KI 20g及I210g溶于100ml水中，使用前再稀释10倍。) 0.2 M Na2HPO3溶液，1% NaCl溶液，1% CuSO4溶液，1%Na2SO4溶液，2%蔗糖溶液， 0.1%淀粉溶液， 溶于0.3% NaCl的1%淀粉溶液，0.2%淀粉的0.3%NaCl溶液 溶于0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液， （一）温度对酶活力的影响 　 表1　温度对酶活力影响实验加样顺序 （二）PH对酶活力的影响 向各试管中加入稀释唾液的时间间隔为1分钟。将各试管中物质混匀，并依次置于37℃恒温水浴中保温。 待向第4管加入唾液2ml后，每隔1分钟由第3管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴KI－I2溶液。添加KI－I2溶液，检验淀粉的水解程度。待混合变为棕黄色后，向所有试管依次添加1-2滴KI－I2溶液。添加滴KI－I2溶液的时间间隔，从第1管起，亦均为1分钟。 观察各试管中物质呈现的颜色，分析pH对唾液淀粉酶活性的影响。 （三）唾液淀粉酶的活化及抑制表3　唾液淀粉酶活化及抑制实验加样顺序 （四）酶的专一性 表4 淀粉酶专一性加样顺序 【实验结果】 观察并以表格形式记录各管发生的全部现象，同时分析评价实验结果。 * * 1.5 1.5 1.5 1.5 0.2%淀粉的0.3% NaCl溶液（ml） 冰浴5min 1-2滴 冰浴5min 1 1 37℃恒温水浴5min 1 2 冰浴5min后转37℃恒温水浴5min 沸水浴5min KI－I2液 1 1 稀释唾液（ml）（已冰浴5min ） 4 3 管号 【方法步骤】 2 2 2 2 稀释唾液（ml） 混匀,于37℃恒温水浴中保温 2 2 2 2 0.5%淀粉的0.3% NaCl溶液（ml） 8 6.8 5.8 5 PH 0.1 1.1 2 2.4 0.1mol/L柠檬酸溶液（ml） 4.9 3.9 3 2.6 0.2M Na2HPO3溶液（ml） 4 3 2 1 2-3 2-3 2-3 2-3 KI－I2溶液（滴） 37℃恒温水浴中保温5分钟 0.5 ------- ------- ------- 蒸馏水（ml） ------- 0.5 ------- ------- 1% Na2SO4溶液（ml） ------- ------- 0.5 ------- 1% CuSO4溶液（ml） ------- ------ ------- 0.5 1% NaCl溶液（ml） 0.5 0.5 0.5 0.5 稀释的新鲜唾液（ml） 1.5 1.5 1.5 1.5 0.1%淀粉溶液（ml） 4 3 2 1 管号 沸水浴2～3分钟 1 1 1