2015-2016学年高中生物 2.3分解纤维素的微生物的分离同步训练（含解析）新人教版选修1.docVIP

第7课时　分解纤维素的微生物的分离 目标导航　1.了解纤维素在生物圈的分布；知道纤维素酶的组成和作用。2.知道刚果红染色法的原理；了解两种刚果红染色法的要领。 一、基础知识 (一)纤维素与纤维素酶 1．纤维素的化学组成 由________三种元素组成，是一种多糖。纤维素的基本组成单位是葡萄糖，人体内没有分解纤维素的酶，所以人体不能直接利用纤维素作为能源物质，但土壤中有分解纤维素的微生物，最终把纤维素分解成二氧化碳和水释放到无机环境中去。 2．纤维素的分布 ________是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，木材、作物秸秆等也富含纤维素。纤维素产生于植物的光合作用，地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨。 3．纤维素酶的组成 纤维素酶是一种________，一般认为它至少包括C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶三种组分。 4．作用机理 纤维素____________________。 5．纤维素酶催化纤维素水解的实验验证 试管 滤纸条 0.1 mol/L醋酸—醋酸钠缓冲溶液pH＝4.8 纤维素酶70～80 U/mL 条件结果 1 1×6 cm 10 mL 1 mL 两试管固定在50 mL锥形瓶中，在摇床上以140 r/min的转速振荡反应1 h 时间足够长，滤纸被________ 2 1×6 cm 10 mL 基本无变化 (二)纤维素分解菌的筛选 1．筛选方法：________________。 2．筛选原理 当我们在含纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成____________。当纤维素被________分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以________________为中心的透明圈，这样，我们就可以通过________________来筛选纤维素分解菌。 3．两种刚果红染色法 (1)先________________，再加入________进行颜色反应。 (2)在________时就加入刚果红。 二、实验设计 1．实验流程 2．设置对照 将1实验流程中的选择培养基改为__________的培养基，如牛肉膏蛋白胨基础培养基，其余过程均与1实验流程相同。 3．梯度稀释 用1 mL无菌吸管从选择培养基中吸取1 mL培养液注入盛有9 mL无菌水的试管中，吹吸三次，使充分混匀；然后再用一支1 mL无菌吸管从此试管中吸取1 mL菌液注入另一支盛有9 mL无菌水的试管中，以此类推配制成101、102、103、104、105、106倍的各种稀释液。 4．涂布培养 将鉴别培养基三个平板分别用记号笔写上104、105、106倍的三种稀释液，另取三个不含纤维素的培养基平板，分别用记号笔写上104、105、106倍的三种稀释液；然后用三支1 mL无菌吸管分别从104、105、106倍的三管稀释液中吸取________对号滴入已写好稀释度的平板上，用无菌玻璃涂布器在培养基表面轻轻地涂布均匀。 将培养基平板________于30～37℃温室中培养1～2 d，每隔24 h观察菌落情况。 5．筛选菌株 (1)刚果红染色。 (2)挑选菌落：将产生明显________的菌落，挑取并接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在30～37℃下培养，可获得纯种。 6．结果分析与评价 (1)培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落：对照的培养基在培养过程中________菌落生长，则说明培养基制作合格；如果观察到________透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物。 (2)分解的结果是否一致：由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量，因此最容易得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同，学生也可能得到真菌和放线菌等不同的分离结果。 7．课题延伸 (1)为了确定分离得到的是纤维素分解菌，还需要进行________________的实验，纤维素酶的发酵方法有________发酵和________发酵两种。 (2)纤维素酶的测定方法：一般是采用对纤维素酶分解纤维素后所产生的________含量进行定量测定。 知识点一　基础知识 1．下列关于分离纤维素分解菌的实验的叙述，有误的是(　　) A．经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 B．选择培养这一步可省略，但培养纤维素分解菌少 C．经稀释培养后，用刚果红染色 D．对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上 2．在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是(　　) A．分解尿素的细菌 B．硝化细菌 C．分解纤维素的细菌 D．乳酸菌 知识点二　实验设计 3．有些微生物含有纤维素酶，通过对这些微生物的研究和应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。纤维素酶可以通过微生物进行发酵生产，为了提高酶的产量，请你设计一个