大黄素-铜(Ⅱ)配合物与核酸作用的荧光光谱及分析应用.pdfVIP

V01．30 第30卷专辑 南昌大学学报(理科版) Suppl of 2006年9月 Journal NanchangUniversity(NaturalScience) Sept．2006 文章编号：1006—0464(2006)专辑一1103—02 大黄素一铜(II)配合物与 核酸作用的荧光光谱及分析应用 文志刚，李舒婷，田建袅，赵书林 (广西师范大学化学化工学院，广西桂林541004) 摘要：以大黄素一铜(II)配合物为荧光探针，利用荧光光谱法研究了大黄素一铜(II)配合物与核酸的相互作用。 研究表明在实验条件下，铜(11)离子与大黄素结合形成金属配合物后，产生很强的荧光，核酸能显著降低该配合物 的荧光强度。而且荧光强度的降低值与核酸浓度成正比。据此建立了测定核酸的新方法。该法测定的线性范围 为0．08—1．2 P,gmL～，检测限为0．020mL～。对合成样品进行分析，结果满意。 ILg 关键词：荧光探针；大黄索；铜；核酸 中图分类号：0657 文献标识码：A mmol／LTris— 脱氧核糖核酸(DNA)作为重要的遗传物质，它工厂)，溶于水中。缓冲溶液均为10 的定量测定对于研究核酸的生物化学反应，发展核 HCI缓冲溶液。实验用水为二次亚沸蒸馏水。 酸的医药制品以及对疾病的诊断和防治均具有重要 1．2实验方法 意义。由于核酸本身的荧光很弱，直接运用其内源 于10 EM标准 mL容量瓶中，依次加入100仙L mL mL 荧光，来研究它的生物性能及测定其含量受到了很 溶液，0．4 Cu“标准溶液和1．0Tfis—HCI缓 大的限制¨二‘。通过使用荧光染料、金属配合物，目 冲溶液，然后加入适量的核酸标准溶液，用水稀释至 前已建立了多种检测核酸的荧光分析方法∞“l。大 刻度，摇匀。用1cm石英池，于激发波长279nm和 黄素是中草药大黄、决明、虎杖和篇蓄等中的一种有 发射波长434 nm处，测定试样的荧光强度F值和空 效成分，来源广，易于提纯。本文以大黄素为配体， 白试剂的荧光强度Fo值，计算荧光强度差(AF= 探讨了利用大黄素一铜(II)配合物被作为探针来测Fo—F)。 定核酸的可能性。研究表明，铜离子与大黄素结合 2结果和讨论 形成金属配合物，产生很强的荧光，而且核酸能显著 地降低该配合物的荧光强度，而且荧光强度的降低 2．1光谱特征 值与核酸浓度成正比。据此建立了测定核酸的新方 法。 图1所示。EM—Cu(II)在434am处有最强的荧光 1实验部分 发射，表明EM与Cu(II)形成了二元配合物。但 1．1仪器和试剂 Ls一55荧光分光光度计(PerkinElmer公司)； TU一1901双光束紫外可见分光光度计(北京普析该结果表明EM—Cu(II)配合物能与核酸相互作 通用