胸水细胞块在荧光原位杂交检测肺癌EGFR基因中应用.pdfVIP

程度较相似的肿瘤，对化疗的反应及治疗效果也存在较大差别。肿瘤药敏测定有助于为患者选择有效的化 疗药物和制定合理的治疗方案，尽可能排除或减少无效药对机体的毒副作用，防止多重耐药性的产生，以 期提高治疗效果。 肿瘤药敏试验有多种方法，可在动物体内进行，也可在体外用新鲜肿瘤标本或细胞株等检测。体内药 敏试验有裸鼠模型法和肿瘤肾包膜下移植法，但因实验条件复杂，价格贵，实验周期长等原因，在医院临 床上推广应用受到限制。目前较常用的体外药敏试验方法有偶氮唑盐比色法(MTT法)，放射性标记核酸 前体掺入法，CCK．8法，组织块培养一终点染色一计算机图像分析法(TEc认)，胶原凝胶小滴植入法 (CD DST)，三磷酸腺苷生物发光法(ATP CSA)等。其中MTr药敏试验方法简便快捷，在国内应用 性同位素和有机溶剂，灵敏度高，但比较贵，经费充足时，可用CCK．8试剂。TECIA和CDDST法操 作步骤较少、简便易行、较小样本就可检测，敏感性也较好。ATP-TCA法通过测定细胞内源性ATP的 含量来评估化疗药物对肿瘤细胞的杀伤效果，相对有更高的灵敏性和特异性，可重复性好。随着药敏方 法的逐步改进和成熟，药敏检测在临床用药和个体化治疗方面的参考价值正在引起重视，发挥着一定的 积极作用。 胸水细胞块在荧光原位杂交检测肺瘫GFR基因中的应用 郭以河张闽峰孟加榕禹 乐 戴太监温路生刘美莲 (解放军175医院，厦门大学附属东南医院病理科，福建漳州363000) 本收集平台。方法：采用肺癌患者阳性胸水离心获取肿瘤细胞制作成石蜡细胞块，免疫组化分型后进行HSH 良好的效果。结论：胸水细胞块完全能够为肺癌患者提供准确的EGFR基因扩增情况的结果，指导肺癌患 者的靶向治疗。 【关键词】细胞块；荧光原位杂交；肺癌；EGFR 肺癌是当今世界上严重威胁人类健康和生命的恶性肿瘤。近年来，我国肺癌发病率和病死率也呈显著 上升趋势【l】。染色体畸变是肿瘤发生、发展过程中的重要事件，染色体异常改变的检测已经成为指导一些 insitu 实体肿瘤临床诊断、治疗以及预后的一个有效指标【2】。目前荧光原位杂交(fluorescence hybridization HSH)技术广泛应用于基因的检测，但实体瘤检测都是用手术切除标本进行，笔者用胸水离心细胞块进行 FISH检测EGFR基因扩增情况，取得了良好的效果，尚未见报道。胸水细胞块技术可广泛应用癌性胸水患 者，对肿瘤的分型及靶向治疗提供了病理学依据，现报道如下。 1材料和方法 迈新公司：EGFR基因扩增试剂盒购自北京金菩嘉公司。 1．2方法 91 I 2 l脚水细胞块制鲁^浩①临球送蛤新鳍脂水．通过细胞学凉片诊断见到痛细胞的病例，用15ml尖底 离心管取约l 弃上清；②]JII^4％·}_性牛碰6m J，震荡，③静置30mln左右，再离心，弃上消．固用吸管将离心管底部的 细胞吸取到丑微镜擦镜纸上，乜好，艘入4％中性甲醋标本杯，等常舭甜纵墩村后， 起放^自动脱水机中 进行组织处理，制成石蜡细胞块。 1 2．2免疫组化冉法把细胞抉切成3pro切片，60C烘十1 色．苏木素复染，中性树1捩封固，显微镜下观察， 1 2．3 光显微镜下观察并分析杂交结粜。 2结果 我们对肋水离心细胞块进行组织学切“，HE染色确定宵肿瘤细胞后，进行免疫组织化学染色对肿瘤进 性胸水忠者．细胞收集成功的19N，l例陆『红细胞过多没自制作成细胞块，19例均通过免疫组织化学鉴别， 其中11例肺腺癌，4侧肿鳞癌，2例肺小细胞癌．2N间皮细胞增生。我们对其中的17倒肺鳞癌或腺癌的细 胞块进#77FISH检测-其中EGFR基因扩增1 3例，其余4例没有扩增。检测效果良好，荧光信号明显清晰， 红蓝对比明显-DAPI复染细胞核轮廓清晰(附图l-4)，比较容易进行囊光显微镜下分析。 附图 胸水细№块FISH女洲EGFR赫