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实验五 真菌形态观察和微生物菌落形态比较.ppt
一、实验目的 掌握真菌水浸片的制作 显微观察酵母菌的基本形态及出芽生殖 显微观察常见丝状真菌的基本形态 比较细菌、真菌和放线菌的菌落形态 二、实验菌种 酵母:酿酒酵母(白酵母)、红酵母 丝状真菌:根霉、曲霉、青霉、犁头霉 细菌:大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、八叠球菌 放线菌:S-10,S-14 * 作业中的问题 实验三、土壤中微生物含量的计算 CFU的计算 稀释倍数=104 稀释倍数=103 每克湿重土壤所含微生物量等同于三角瓶中10ml悬液所含微生物量。 cfu/克湿重土壤=从三个稀释度所求得三角瓶中每毫升悬液中总活菌数 x 10 cfu/克湿重土壤 =平均菌落数x5x稀释倍数 稀释倍数=102 三角瓶中每毫升悬液中总活细菌 平均 3 2 1 平均 3 2 1 平均 3 2 1 菌落数 10-5 10-4 10-3 稀释度 真菌实验结果记录 作业中的问题 实验四、革兰氏染色 对CFU的认识 实验五 真菌形态及微生物菌落形态的观察 菌落形态观察 制片观察: (平板:一套可打开用于制片观察,一套不能打开用于菌落形态观察) 酿酒酵母、根霉、曲霉、青霉、犁头霉 三、实验原理 (一)、真菌形态观察 通常把真菌分为酵母菌和丝状真菌(霉菌)。 霉菌由粗大、有隔或无隔分支状菌丝构成,菌丝分为基质菌丝和气生菌丝。气生菌丝特化结构上产生多种无性、有性孢子。孢子着生部位、排列方式以及孢子形态是真菌鉴定的重要依据。 曲霉 青霉 分生孢子梗 青霉:分生孢子梗 足细胞 曲霉:分生孢子头 根霉:孢子囊、匍匐枝和假根 犁头霉:接合孢子 A. 异宗接合 B. 同宗接合 酵母菌是单细胞构造,个体形态多为卵圆形、圆柱形,但有时某些酵母菌可形成假菌丝。酵母菌无性繁殖以出芽方式生殖。 酵母菌:出芽 酿酒酵母 白色念珠菌 (假丝酵母) Schizosaccharomyces pombe (fission yeast) 裂殖酵母 Saccharomyces cerevisiae (budding yeast) 出芽酵母 有关酵母菌教材外知识 Candidiasis albicans 念珠菌 Symptom 症状实例 有关酵母菌教材外知识 四、实验方法 直接挑取生长在平板中的霉菌菌体制水浸片观察。 载玻片上滴加一滴水 用接种针挑取菌丝 加盖玻片 均匀涂布于水滴中,尽量分散 作图 10倍或40倍物镜观察 制作犁头霉水浸标本片时,在+/-处先去掉表面菌丝,再向下挑(稍微带一点培养基也可),用50%酒精滴洗,去掉孢子。 制作青霉水浸标本时,取菌落边缘白色区域并带一定的培养基,加盖玻片后压片。 根霉水浸标本片时可以不用酒精洗。 1、实验目的要求 观察细菌、放线菌、酵母菌、霉菌等微生物具体菌种菌落的形态特征。 总结几类微生物菌落的一般特征并能识别。 (二)各类微生物菌落特征观察 菌落形态:形状,边缘情况 大小: 表面状况:湿润、粘稠或干燥,隆起或扁平,厚或薄,是否粉末状 质地:致密或疏松 蔓延程度: 与培养基结合程度 颜色(正面、反面、边沿、中心) 气味 微生物在固体培养基上的群体生长 点状 圆状 丝状 不规则状 根状 纺锤状 全缘 波状 裂片状 缺刻状 丝状 卷曲状 细菌菌落特征: 凝胶状、表面较光滑、湿润、与培养基结合不紧密,易挑取,正反颜色一致。 酵母菌菌落特征(与细菌相似) : 比细菌大而厚,不透明,表面光滑、湿润、粘稠,易用针挑起。多呈乳白色,少数呈红色。 Yeast Bacteria 放线菌特征:致密、坚硬、多皱、不易用针挑起,不透明。孢子成熟后,表面粉末状,干燥(常有土腥味)。 霉菌的菌落特征 比细菌菌落大,由菌丝组成疏松的绒毛状、絮状或蜘蛛网状,有的无固定大小,延至整个培养基中,产色素,使菌落显色。 *
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