不同外植体和激素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响.pdfVIP

2008 年 3 月 山 东 师 范 大 学 学 报 ( 自 然 科 学 版) Mar . 2008 ( ) 第 23 卷 　第 1 期 Journal of Shandong Normal University Natural Science Vol . 23 No . 1 不同外植体和激素对银杏 愈伤组织诱导和生长的影响 1) 1) 2) 1) 杜希华 　　孙秀玲 　　郝岗平 　　侯福林 ( 1) 山东师范大学生命科学学院 ,250014 ,济南 ; 　2) 泰山医学院生物技术教研室 ,271000 , 山东泰安 ∥第一作者 42 岁 ,男 ,副教授 ) 摘要 　以银杏胚的不同部位子叶、胚芽、胚轴 、胚根为外植体 , 比较不同外源激素和培养条件对银杏愈伤组织诱导和继代培 养的影响 ,结果表明子叶最易诱导愈伤组织 ,且在暗条件下诱导效果最好 ,2 ,4 - D 和BA 影响子叶的愈伤诱导能力 ; 以茎段为外植 体 ,发现生长素为茎段愈伤组织诱导所必需 ,且NAA 诱导效果好于 2 ,4 - D ; 以叶片为外植体 ,发现生长素中的NAA 诱导愈伤效果 最好 ,雌雄叶的诱导能力相同. 在愈伤组织生长过程中,NAA 是子叶和茎段愈伤组织继代培养必需的 ,BA 对茎段愈伤组织生长速 度无显著影响 ,但可使愈伤组织致密 ,并有利于分化. MS + 1 mgLNAA + 0 . 005 mgL KT ( 或 BA) 的培养基对叶片愈伤组织生长最理 想 ,雄叶愈伤生长较快 ,光照培养促进愈伤组织生长. 关键词　银杏 ; 　外植体 ; 　激素 ; 　愈伤组织诱导 ; 　继代培养 中图分类号　Q 949 . 64 ( ) 银杏 Ginkgo biloba L . 是现存种子植物中最古老的孑遗植物 ,是源于我国的特有珍贵树种. 其叶中所含的银杏黄酮和银 杏内酯 、白果内酯等成分[ 1] ,在临床上被用作治疗多种疾病的特效药物. 目前医用银杏黄酮类和内酯类药物仍依靠从银杏叶 提取 ,但由于含量低 ,需消耗大量的银杏叶源 ,而且采叶影响树体生长和种实产量. 因此利用植物组织和细胞培养技术生产银 杏黄酮和内酯类化合物并探讨有效提高培养细胞中有效药用成分的产量[2 ] ,解决银杏生产和应用开发中所面临的困难具有 积极的现实意义. 近年来 ,虽然有一些关于银杏愈伤组织培养的研究报道[3 ,4 ] ,但均缺乏系统性. 本实验室经过多年的实验 ,系 统研究了外植体类型 、性别 、生理状态 、培养基激素配比及培养条件等因素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响 ,为探讨愈伤组 织生长与银杏黄酮和内酯类合成之间的相互关系打下了基础 ,并可为进一步的工业化生产提供实验依据. 1 　材料与方法 ( 1. 1 　材 　　料 　银杏种子购 自山东省郯城县银杏生产基地. 银杏茎段和叶片采 自山东师大校园内的成树 树龄约 55 年 ,按雌 ) 雄树定株采集 . 1. 2 　外植体消毒 、接种和培养 1. 2 . 1 　胚不同区段 　剥去种子的骨质中种皮 ,在 75 %乙醇中浸泡 15 s ,再用 0 . 1 %HgCl2 灭菌 8 min ,