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运动对心脏降钙素基因相关肽及受体表达的影响1 潘珊珊，孙晓娟，潘孝贵 上海体育学院运动科学学院，上海（200438 ） E-mail ：panshanshan@ 摘 要：目的：探讨不同负荷运动对CGRP 及其受体在心脏组织中表达的影响及其作用机 制。方法：健康雄性SD 大鼠60 只，随机分为对照组、耐力运动组和力竭运动组。实施不 同负荷运动训练后，采用放射免疫法、免疫组化法、免疫荧光法和计算机图像分析技术检 测心肌组织中CGRP 的含量和CGRP 受体的表达。结果：耐力运动使心肌组织中CGRP 含 量显著增加，CGRP 受体免疫反应明显增强；力竭运动使心肌组织中CGRP 含量显著减少， CGRP 受体免疫反应明显减弱。结论：适宜负荷的运动使心脏CGRP 的产生与分泌增加， CGRP 受体表达上调，以改善冠状循环和心肌血液供应，对心肌细胞具有保护作用；超负 荷运动使心脏CGRP 含量明显减少，CGRP 受体表达下调，从而使CGRP 对心肌细胞的保 护作用减弱，可能是导致心肌损伤的重要原因之一。 关键词：运动，降钙素基因相关肽，降钙素基因相关肽受体，心脏，大鼠 中图分类号：G804 文献标识码：A 1. 引言 适宜负荷运动可引起心脏结构和功能的生理性重塑，而超负荷运动可造成心脏结构的 损伤性改变。降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide, CGRP ）是目前发现的最强 的内源性舒血管活性物质之一，在运动时对心肌收缩力的增强及冠脉循环的改善起重要的 [1,2] 调节作用 。CGRP 必须与靶细胞表面的CGRP 受体结合才能发挥生物学效应，CGRP 受 体在CGRP 引起的心脏调节机制中起着重要的介导作用[3] 。目前已有研究表明运动能够引 起血浆和心脏中CGRP 水平发生改变，但有关运动对心脏CGRP 受体的影响研究尚未见报 道。因此，本研究采用放射免疫法、免疫组化法、免疫荧光法和计算机图像分析技术从细 胞水平探讨不同负荷运动对CGRP 及其受体在心脏组织中表达的影响及其作用机制，为进 一步揭示运动心脏的本质提供实验依据。 2. 材料与方法 2. 1 动物及实验模型的建立 选用健康雄性 Sprague-Dawley 大鼠 60 只（由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提 供），体重约180～200 克，常规分笼饲养。室温20～22 ℃，相对湿度45～50%，每日光照 时间为12 小时。大鼠适应性饲养 1 周，每天以 15m/min 的速度进行10min 适应性跑台练 习。1 周后将大鼠按体重分层，随机分为对照组、耐力运动组和力竭运动组，每组20 只。 对照组常规饲养，不加干预。耐力运动组和力竭运动组常规饲养的同时，在电动鼠类跑台 上进行运动训练，每周 5 天，持续 10 周。运动负荷参照Powers[4]标准，训练组第 1 周以 25m/min×30min 的运动负荷训练，第2 周增至25m/min×60min ，第3 周增至30m/min×90min， 维持上述负荷训练至10 周结束。力竭运动组在最后一次训练后24h 进行力竭运动，大鼠在 跑台上先进行5min 适应性跑，逐渐递增速度至30m/min，维持该运动强度至力竭，同时记 录运动时间。力竭判断标准为：大鼠爬卧跑台，10 秒内无法完成翻正反射。每天观察大鼠 1 本课题得到教育部高等学校博士学科点专项科研基金资助课题（20040277001 ）和上海市教育委员会科 研项目(07ZZ119)资助。 - 1 - 的一般状况，测量饮食量和体重以监控建模过程。 2. 2 心肌组织CGRP 含量的放射免疫测定 各组取半数大鼠以0.4%戊巴比妥钠（1ml/100g 体重）腹腔麻醉后，迅速取其心脏，冰 生理盐水冲洗血迹，滤纸吸干，用电子天平称取100 mg 左心室心肌组织，放入5 ml EP 管 中，用眼科剪尽快、尽量剪碎，按照 1:10 的比例加入 0.9% 生理盐水，在电动匀浆器