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维普资讯 第17卷 第2期 湖 南 城 市 学 院 学 报 (自然科学版 ) Ⅷ ． i7N_0．2 2008年6月 JournalofHunan City University (NaturalScience) Jun． 2008 邻氨基苯甲酸荧光猝灭法测定四环素 刘明娣 (三门峡职业技术学院 生化工程系，河南 三门峡 472000) 摘 要：基于盐酸四环素能够猝灭邻氧基苯甲酸的荧光且荧光猝灭程度与四环素的量成正比，建立了一 种测定微量四环素的方法．在pH9．0的硼砂缓冲溶液 中，邻氨基苯甲酸的激发波长 。=321nm、发射波长 。 = 405nm．四环素的吸收波长在400nm与邻氨基苯甲酸的荧光发射谱重叠，能有效转移邻氨基苯甲酸的荧光 能量导致邻氨基苯甲酸荧光的猝灭，四环素的浓度在3．0xl0～～2．0x10一mo1．L 与荧光猝灭程度成线性关系。 方法检出限为7．8×10一mo1．’．该方法可用于片剂中四环素的测定． 关键词：邻氨基苯 甲酸；荧光；猝灭；四环素 中图分类号：065 文献标识码：A 文章编号：】672—7304(2008)02—0062—03 四环素(Tetracycline，TC)是一种广谱抗菌素， mo1．L 邻氨基苯 甲酸工作溶液，2．5mLpH9．0的 为氢化骈四苯的衍生物，在临床中广为应用．四 硼砂缓冲溶液，用水稀释至刻度，摇匀后放置 10 环素还可作为荧光探针用以诊断癌症．关于四环 min．用 Icm的石英荧光池，在激发波长为321 素的测定方法，已有许多报道，如荧光法…、微 nm，发射波长为405nm处，测量体系的荧光强度． 生物法 、分光光度 扪、高效液相色谱法 、化 学发光法L5等． 2 测定步骤 本文提出在 pH=9、0的硼砂缓冲溶液中利用 2．1 体系的荧光光谱 四环素能有效的猝灭邻氨基苯甲酸(OAA)的荧 对体系进行荧光光谱扫描可知，邻氨基苯甲 光，在一定条件下，荧光猝灭值与四环素的浓度 酸的最大激发波长为 321nm，最大发射波长为 成正比，来检测四环素的方法 ，检出限为 7．8x10。 405nm．四环素的加入对邻氨基苯甲酸的荧光产 mo1．L～，不经分离可直接测定盐酸四环素片剂中 生猝灭(见图1)，且猝灭程度随四环素浓度的增加 的四环素，回收率达 96％～99％．由此建立了一 而增大．据此可以建立邻氨基苯甲酸荧光猝灭测 种简单、快速、灵敏的分析方法． 定四环素的新方法． 1 实验部分 鲁 里 置 1．1 仪器与试剂 誉 F-4500型荧光分光光度计 (日本 ，日立)， 釜 菪 U 1100紫外分光光度计 (中国，天美 )，Orion 毒 酸度计(美国，热电)． 喜 邻氨基苯 甲酸标准溶液：邻氨基苯 甲酸配制 夏 成 1．0xl0一mo1．L一，使用时用水稀释为 1．0xl0 mo1．L 的工作液．盐酸四环素标准溶液：用盐酸 W avelength／nm 四环素标准品配制成 1．OxlO—mo1．L 的盐酸四环 (C0AA2．5xlO～mol-L一，CTc=lxlO otolL·。)