肿瘤细胞DNA倍体分析和临床意义.pdfVIP

维普资讯 · 622 · 中国药物与临床2004年8月第4鲞笪 塑 !!!!!!!!竺鱼! ：!：!!! ：!!：!： 肿瘤细胞DNA倍体分析及临床 意义 山西省肿瘤医院病理科(030ol3) 李建民 丛 娟 徐恩伟 细胞的生长、分化 、分裂等性状是由细胞核内遗传物质 质一染色体变化的全部过程 。在细胞生物学中发挥了重要作 DNA所决定的。细胞生物学研究证实，细胞分裂增生最重要 用。FCM与分子生物学技术结合，可以单细胞为基础探讨分子 的物质基础是DNA的复制。正常细胞核DNA的含量相当稳定， 水平变化。将染色体原位杂交术(FISH)与荧光系标记的基因 细胞的增生是以DNA~-倍体的形式出现。细胞增生周期的4 探针结合：或以荧光素标记不同碱基后用于DNA序列测定等 j。 个时相I~[IGl期、S期、G期 、M期和非增生状态的G。期细胞，其 标准DI和标准RI的意义及作用：DI表示DNA含量，正常DI DNA含量划分为 G 、S、G#M3个范围。测定细胞核中DNA 为0．9～1．10，DI≥1，1l表示异倍体。RI表示RNA含量，正常 RI为 含量．直接反映细胞群的增生能力和增生速度…。 9．0～11．0，R1≥11．1表示RNA含量增加 。RI=样品细胞GdGI期细 肿瘤细胞生长的特点是DNA含量增高。良性肿瘤细胞是 胞峰道均值耐照样品GdG期细胞峰道均值×10E。 以4倍体增多：其肿瘤组织中细胞DNA含量随4倍体细胞数增 判断被检测组织细胞的DNA含量，必须选择相应正常组织 多．肿瘤的生物学行为将发生改变 。恶性肿瘤细胞表现为非 细胞的DNA含量为参考值。严格地说应该选择同种类、同性别 整倍体增多[31。测量单个完整细胞的DNA含量 ，计算其群体各 的正常组织的细胞，而不宜使用其他种类动物细胞为参考值[7_。 细胞周期时相的比率。分析该群体的增生状态。这种通过测 以往判断肿瘤预后多采用DNA异倍体为指标。研究发现 定细胞核DNA含量来间接地判断肿瘤 良、恶性质是研究肿瘤 在良性肿瘤即可出现一定的异倍体率。这是因为在良性肿瘤 的一种方法。测定肿瘤细胞DNA含量的方法有分光光度计检 细胞中也有DNA修复与复制而导致DNA含量增加的过程。但 测法、真彩色医学图像分析系统测定法、流式细胞仪检测法 良性肿瘤DNA含量变化范围既不同于正常组织．更不同于恶 等。目前主要使用流式细胞仪 (flowcytometry，FCM)和图像 性肿瘤组织。所以用正常肿瘤组织DNA含量(二倍体)和异倍 分析仪(imagecytometry，ICM)进行检测。 体来判断肿瘤的性质及预后，有的时候也就不可避免地出现 1 肿瘤细胞DNA的测定方法 假阴性和假阳性结果 。体内细胞的增生状况，有时还需结合 DNA是细胞的分子生物遗传学基础，其含量直接反应了 肿瘤细胞的其他生物学特性才能比较全面地分析和判断肿 细胞增生特征。肿瘤细胞DNA含量的测定可以了解肿瘤细胞 瘤细胞的良性或恶性程度．． 的生物学特性[“] 恶性肿瘤具有恶性增生的特点。其表现为G 期的肿瘤 1．1 采用分光光度计检测法测定DNA含量：取组织连续切片 细胞数量增高，而处于G 期的肿瘤细胞比率越高，肿瘤细胞 l张，用Feulgen染色，用分光光度仪，光源波长550Ixm，根据癌 的数量增长速度越快，肿瘤细胞的倍增时间越短[1．82。 细胞核大小定光栏 ，一波双区法。以同例癌组织中淋巴细胞 FCM应用已做工作：①抗癌药物对细胞周期的影响，药物 核DNA含量平均值为二倍体对照值测定。 对细胞周期的作用研究：②癌基因或抑癌基因的表面抗原表 l、2 真彩色医学图像分析系统测定法：取组织石蜡包埋切片 达及其与细胞周期时相的关系；③细胞程序性死亡 (凋亡)； 5 m厚，Feulgen染色；在图像分析系统软件中进行细胞核 ④细胞动力学以及核型分析；⑤多药抗药性的研究等_ll，．8]。 DNA含量测定，以同