APC不同功能区域对结肠癌细胞株HT_29中_连环蛋白表达影响.pdfVIP

( ) 中南大学学报 医学版 　20 10 , 35 (2) 　　http : / / xbyx. xysm. net ( ) 140 J Cen t S ou th Un iv M ed S ci APC不同功能区域对结肠癌细胞株 HT29 中 β 连环蛋白表达的影响 1 1 2 2 2 吕梁 , 霍继荣 , 刘佳 , 武捷 , 王捷 ( 1. 中南大学湘雅二医院消化 内科 , 长沙 4 3 0 0 1 1; 2. 广州军 区广州总医院医学实验科 , 广州 5 10 0 10 ) [摘要 ] 　目的 : 探讨含有 A PC 蛋 白不 同功能 区域 的 p EGFP N 3 A PC 重组质粒对 结肠癌细胞株 H T 2 9 中 β连环蛋 白表达 的影响 。方法 : 脂质体介导重组质粒 p EGFP N 3 A PC 1 ～5 转 染 H T 2 9 , 采 用绿色 荧光及 R T PCR 验证重组质粒在细胞 中的表达 。以 W e stern 免疫 印迹检测转染后 H T 2 9 细胞 中 β连环 蛋 白的表达 , 以 SPSS 13. 0 软件分析 电泳条带 的灰度值 。结果 : 重组质粒转染 H T 2 9 细胞后 , 绿色荧光 及 R T PCR 结果显示 5 个 A PC 蛋 白不 同功能区域多肽可在细胞 中表达 。W e stern 免疫 印迹 结果显示 , 重 β 组质粒 p EGFP N 3 A PC 1 , p EGFP N 3 A PC 2 和 p EGFP N 3 A PC 3 对 连环蛋 白表达无影 响 , 而 p EGFP N 3 β A PC4 和 p EGFP N 3 A PC 5 均可 降低结肠癌细胞株 H T 2 9 中 连环 蛋 白的表达水平 , 其 中以 p EGFP N 3 A PC 5 的抑制程度最强 。结论 : 含有 A PC 蛋 白中 15 氨基重复序列 + SAM P 重复序列 的 A PC 5 基 因片段 既 可有效降低 β连环蛋 白的表达 , 同时又是相对长度较短 的可用于基 因治疗 的最优片段 。 β [关键词 ] 　 A PC ; 　重组质粒 ; 　转染 ; 　 连环蛋 白 DO I: 10. 3 9 6 9 / j. issn. 16 7 2 7 3 4 7. 2 0 10. 0 2. 0 0 9 Effect of recom b inan t pEGFP N