DNA条形码鉴定洋金花与其伪品.pdfVIP

·1408 · 药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 2011, 46 (11): 1408−1412 DNA 条形码鉴定洋金花及其伪品 1 1, 2 1 1 1 1* 韩建萍 , 李美妮 , 罗 焜 , 刘美子 , 陈晓辰 , 陈士林 (1. 中国医学科学院、北京协和医学院药用植物研究所, 中草药物质基础与资源利用教育部重点实验室, 北京 100193; 2. 西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100) 摘要: 为建立有毒中药洋金花及其伪品 DNA 条形码鉴定方法, 采用国际通用的条形码序列 ITS2 、psb A- trnH 、matK 和 rbcL 对洋金花原植物白花曼陀罗及其伪品毛曼陀罗、曼陀罗和木本曼陀罗 4 个种共计 20 份材料 进行了比较研究。PCR 及测序成功率分别为 ITS2 (100%) 、matK (100%) 、psb A-trnH (90%) 、rbcL (85%) 。采用 CodonCode Aligner 进行序列拼接, 采用 MEGA 4.1 计算白花曼陀罗及其伪品的种内、种间的 K2P 距离, 并基于 K2P 模型构建 NJ 树。结果显示 ITS2 序列共有 30 个单核苷酸多态性 (SNPs) 位点、psb A-trnH 序列有 33 个单碱 基的插入和缺失。ITS2 和psb A-trnH 序列种间遗传距离大于种内, matK 和 rbcL 种内和种间没有明显“Barcoding Gap ”。4 个条形码序列及其组合获得的分子系统树 (ITS2 、psb A-trnH 、matK 、rbcL 、matK +rbcL) 均分成了两 大支, 木本曼陀罗单聚为一支, 该分子证据支持将 Brugmansia 提升为属水平。实验结果表明 ITS2 及 psb A-trnH 序列可以作为洋金花及其伪品鉴定用的条形码序列。 关键词: 曼陀罗属; DNA 条形码; 分子鉴定 中图分类号: R931 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (2011) 11-1408-05 Identification of Daturae Flos and its adulterants based on DNA barcoding technique 1 1, 2 1 1 1 1* HAN Jian-ping , LI Mei-ni , LUO Kun , LIU Mei-zi , CHEN Xiao-chen , CHEN Shi-lin (1. The Key Laboratory of Bioactive Substances and Resources Utilization of Chinese Herbal Medicine, Ministry of Education of PRC, Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sci