柴胡-黄芩药对保肝作用有效部位的研究.pdfVIP

柴胡-黄芩药对保肝作用有效部位的研究1 许刚，谢鸣* 北京中医药大学国家重点方剂学学科，北京（100029 ） E-mail ：xieming603@263.com 摘 要：目的：探查柴胡-黄芩药对保肝作用的有效部位。方法：采用乙醇沉淀法，将柴胡- 黄芩药对水提液分为A 、B 、C、D四个部位，以血清ALT 、AST为指标，观察柴胡-黄芩药对 水提液及其分离部位合并液对CCL4 急性肝损伤的保护作用；采用正交试验考察A 、B 、C 、 D各部位的保肝效应，最后对分析所得的最佳配伍进行效用再验证。结果：柴胡-黄芩药对 水提液及其分离部位合并液均能明显降低急性CCL4肝损伤模型大鼠血清ALT与AST （P0.05 或P0.01 ）；正交试验表明，C和D对模型大鼠血清ALT 与AST 均有不同程度地降低作用 (P0.05或接近0.05) ，其最佳部位配伍为C+D；重复验证实验表明，C+D组能显著降低模型 大鼠血清ALT与AST(P0.05) ，其效应与柴胡-黄芩药对水提液相当。结论：部位C 、D是柴 胡-黄芩药对保肝作用的主要部位。 关键词：柴胡-黄芩药对；CCL ；保肝作用；有效部位 4 小柴胡汤是中医和解少阳的著名代表方。研究显示，其核心配伍药对柴胡-黄芩具有明 确的保肝作用[1，2] 。虽然现代药理研究证实，柴胡中柴胡皂苷和黄芩中黄芩苷均具有一定的 保肝作用[3，4] ，但基于中医复方是由多味中药配伍而成，复方效用是以方中药味及其成分共 存为基础的特性[5]，实验研究条件下观察到的柴胡皂苷、黄芩苷等有效成分是否就是柴胡- 黄芩保肝作用的物质基础？目前尚不清楚。为此，我们以临床习用的汤剂剂型作为切入点， 在确认柴胡-黄芩水提剂有效的基础上，采取逐级分离，分步跟踪的思路，探察该组药对保 肝作用的主要物质基础。本文利用正交试验，观察了柴胡-黄芩药对不同提部位对大鼠CCL4 实验性肝损伤的保护作用，通过了解各部位间的配伍关系，以确定柴胡-黄芩药对保肝作用 的有效部位。 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 中药 柴胡(为伞形科植物Bupleutrum chinese DC. 的干燥根) 、黄芩(为唇形科植物黄芩 Scutellaria baicalensis Georgi. 的干燥根) ，购自北京同仁堂饮片有限责任公司，由北京中医 药大学中药学院生药系刘春生教授鉴定。 柴胡、黄芩按2 ∶1 比例混匀，以10倍量水浸泡0.5h，加热至沸，提取45min ，过滤，药 渣加9倍量水，加热至沸，提取0.5h，过滤，合并两次滤液，浓缩至折合原药材浓度 1g·mL -1 ，得柴胡-黄芩水提液。 取柴胡-黄芩水提液，在不断搅拌下，滴加乙醇至乙醇浓度为20% ，静置，3000转离心 10分钟，分离得沉淀，作为部位A ；上清液继续加乙醇至乙醇浓度为60%，静置，3000转离 心10分钟，分离得沉淀，作为部位B ；上清液继续加乙醇至乙醇浓度为80%，静置，3000转 离心10分钟，分离得沉淀，作为部位C ；上清液回收乙醇至无醇味，作为部位D 。按配伍要 求取各提取部位，按原有效配方的等剂量（折合原药材剂量）充分混合，以2%吐温80溶液 1本课题得到高等学校博士学科点专项基金（20050026015 ）的资助。 - 1 - 稀释，使之成均匀悬液，配制浓度为折合原药材浓度1g·mL -1 。 1.1.2 试剂 谷丙转氨酶试剂盒(ALT/GPT，批号 、谷草转氨酶试剂盒(AST/GOT，批号： ，均购自南京建成生物工程研究所；四氯化碳（CCL4 ，分析纯，批号）， 购自天津市化学试剂六厂。 1.1.3 动物 SD大鼠，雄性，体重190～210g ，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，合格证号 SCXK (京)-2002-2003 。 1.1.4 仪器 DU800型核酸分析仪：美国