板蓝根多糖对小鹅瘟病毒体外抑制作用的观察.pdfVIP

20 中国兽医杂志 2009年 (第 45卷)第 9期 ChineseJournalofVeterinaryMedicine 板蓝根多糖对小鹅瘟病毒体外抑制作用的观察 李 青，许小琴，王志刚，王 彬 (扬州大学兽医学院，江苏 扬州 225009) 中图分类号：$853．74；$852．65 文献标识码 ：B 文章编号 ：0529—6005(2009)09—0020—02 板蓝根 (radixisatidis)别名靛青根、蓝靛根 ，为 (MTT)购 自Sigma公司 ；GPVM 单克隆抗体 ，由 十字花科植物菘蓝的根 ，具有清热解毒 、凉血利咽之 扬州大学江苏省动物预防医学重点实验室董国雄教 功效。众多文献报道，板蓝根对于禽流感 、猪病毒性 授惠赠 ；FITC标记的羊抗 鼠IgG购 自Sigma公司。 水泻 、鸭病毒性肝炎等均有较好 的治疗或预防作 1．5 病毒的传代培养和细胞病变 (CPE)观察 制 用_】；且具有抑制流感病毒亚甲1型和 3型、呼吸道 备次代 GEFl1。。 ，培养 12h后加入 150肚L含毒鹅 合胞病毒、流行性腮腺炎病毒 、CVB。和 CVB 病毒 胚尿囊液 ，培养 8～10d，取其培养液上清 150 L重 在细胞 内复制[2_3]的作用 ；能杀灭疱疹病毒_4；其水 复盲传 ，直至在光学显微镜下观察出现 CPE为止 煎液对猪细小病毒_5]、猪繁殖与呼吸综合征病毒 。 1．6 间接免疫荧光法 (1FA)检测病毒感染 的细胞 有明显的阻断作用。进一步的研究证实 ，其抗病毒 将上述 出现 CPE 的GEF，按常规方法_l进 行 的有效成分主要与板蓝根的大极性部位相关 ，日本 IFA 测试 。 学者还分离出单一分子量的有抗病毒活性的板蓝根 1．7 IRPS体外抗 GPV作用 以上述细胞适应株 多糖 ]。临床上，周 明宇 用板蓝根等 中药复方 防 GPV。 为种毒，做 以下抗病毒试验 ：待 96孔培养 治小鹅瘟病取得了 良好 的效果 ，胡元亮等 。。报道 板上的次代 GEF长成单层后，按文献[17]方法做药 IRPS对新城疫病毒亦有 比较显著的抑制作用 。 物阻断感染、抑制增殖及直接 杀灭的抗病毒试验。 但板蓝根 多糖 (IRPS)抗鹅细小病毒 (goose 药按 5个稀释度加人物，每个浓度重复 4孔 。其 中 parvovirus，GPV)的试验研 究 ，目前 尚未见报道 。 阻断感染组分别在加入药液培养 4h(阻断感染组 本实验室通过前期鹅胚体上的试验发现：IRPS具有 I)和 24h(阻断感 染 组 1I)后 ，每 孔 加 入 100 极强的阻断 GPV感染 、增殖和保护胚体组织器官 TCID。浓度的GPV 病毒 100 L；抑制增殖组先 免受损伤的作用[1，为进一步探讨其作用机理 ，本 染毒吸附4h后再加药液；直接杀灭组是将各浓度 次研究了IRPS在鹅胚成纤维细胞 (GEF)上对 GPV 药液分别与病毒液混合 37℃作用 4h再接种。置 繁殖的影响。 37℃，5 CO 培 养箱 中继 续培 养 7d，用 MTT 1 材料与方法 法 [1。测定 570nm 处 OD值 ，经 SPSS10．0分析数 1．1 药物 板蓝根粗多糖 ，白色固体粉末 (多糖含 据 ，比较细胞增殖 、活性 的差异 ，以判断 IRPS体外 量为90 ，扬州大学医学院天然药物与 中药研究室 抗 GPV作用的效果 。 刘墨祥教授提供)，参考 IRPS对 GEF生长 的安全 2 结果与分析 浓度_l1，用 DMEM 细胞培养液稀释配制 5个浓度 ， 2．1 细胞病变观察 按上述方法