高产纤维素酶菌株的诱变选育的研究.pdfVIP

( ) 第 33 卷 第 2 期 内蒙古师范大学学报 自然科学 汉文 版 Vol. 33 No. 2 2004 年 6 月 Journal of Inner Mongolia Normal University (Natural Science Edition) J une 2004 高产纤维素酶菌株的诱变选育研究 范　琳 , 牛艳芳 , 房耀维 ( 内蒙古师范大学 生命科学与技术学院, 内蒙古 呼和浩特 010022) 摘　要 : 利用紫外线、亚硝酸及紫外线 - 亚硝酸复合诱变绿色木霉菌株 ,选育出菌落小、透明纤维素水解圈 大的高产纤维素酶变异菌株. 用 DNS 法测定该变异菌株 ,结果表明 ,其纤维素酶活性比出发菌株明显提高 ,且产 酶性能稳定. 关键词 : 绿色木霉 ; 纤维素酶 ; 诱变 ; 选育 ( ) 中图分类号: Q 939. 403 　　文献标识码 : A 　　文章编号 : 2004 纤维素是世界上最丰富的原料之一 ,约占地球植物干重的 1/ 3 左右. 利用纤维素酶 ,通过微生物发酵将 农副产品和工业废料中的纤维素材料转化成糖和蛋白质 ,有可能改变依靠农业生产的传统方法 ,成为饲料、 发酵工业原料和人类食品的新来源 , 同时还可用以处理废物、消除公害、保护环境[1 ] . 纤维素酶来源广泛 ,一 些真菌、细菌、放线菌等在一定条件下均可产生纤维素酶 ,但自然界的野生菌株所产生的纤维素酶活力都比 较低. ( ) ( ) ( ) ( 绿色木霉 T richoderm a vi ride 属于真菌门 fungus , 半知菌亚门 Deutery cotiua ,丝孢纲 Hyphom ) ( ) ( ) ( ) [2 ] lycetes ,丝孢目 Hyphomycetates ,丝梗孢科 Moniliaceae ,木霉属 T richoderm a . 它具有淡色或无色的 蔓延菌丝 ,分隔 ,广布于自然界 ,在腐烂木材、种子、植物残体、有机肥料、土壤和空气中均能分离到 ,可产生纤 维素酶 ,有较强的分解纤维素的能力. 用纤维素酶分解纤维素 ,不但可以处理污染环境的废物 ,还可以得到菌体蛋白[3 ] . 绿色木霉产生的纤维 素酶活性较强 ,且制备方便、经济 ,在纤维素的分解利用方面有重要作用. 自1906 年 Selliere 在蜗牛的消化液 中发现纤维素酶以来 ,近几十年对菌种的筛选、酶的性质、分离、纯化和组分等都有大量研究. 目前研究最多 的菌种是木霉、曲霉、青霉 ,其中木霉活性最高 ,应用最广[4 ] . 我国对纤维素酶的理论研究和应用已有很大进 展 ,但野生菌种产生的纤维素酶活性不高 ,分解纤维素的能力也较差 ,与工业化生产的要求尚有一定距离. 因 此 ,采用各种手段诱变和筛选高产菌株 ,是当前研究的一个重要课题. 本文以降解纤维素的绿色木霉作为出发菌株 ,对其进行了紫外线、亚硝酸及复合诱变处理 ,最终获得了 纤维素酶活性显著提高的突变菌株. 1 　实验材料和方法 1. 1 　出发菌种 绿色木霉由内蒙古师范大学生命科学与技术学院微生物实验室提供. 1. 2 　培养基 1. 2. 1 　斜面培养基 　马铃薯 200 g ,葡萄糖 20 g ,琼脂 20 g ,MgSO 0. 5 g , KH PO 1.