2014-003基因组编辑技术.pdfVIP

－ 中国农业科技导报，２０１４，１６（１）：３２ ３８ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ 基因组编辑技术改良家畜的研究进展 魏景亮，　 吴添文，　 阮进学，　 牟玉莲∗ （中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 １００１９３） 摘　 要：基因组编辑技术是一种能精确改造生物基因组，实现基因定点敲除和外源基因定点整合的技术。 近 年来出现的锌指核酸酶（ｚｉｎｃｆｉｎｇｅｒ ｎｕｃｌｅａｓｅｓ，ＺＦＮ）、类转录激活因子效应物核酸酶（ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ⁃ｌｉｋｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｎｕｃｌｅａｓｅｓ， ＴＡＬＥＮ）和成簇规律间隔短回文重复与 Ｃａｓ９ 蛋白（ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ ｒｅｇｕｌａｒｌｙ ｉｎｔｅｒｓｐａｃｅｄ ｓｈｏｒｔ ｐａｌｉｎｄｒｏｍｉｃ ｒｅｐｅａｔｓ，ＣＲＩＳＰＲ／ Ｃａｓ９）三种基因组编辑技术，可以在靶位点切割ＤＮＡ双链，诱发细胞内源性修复 机制，发生同源重组修复或非同源末端连接，从而提高了基因的敲除、定点整合和替换效率。 这些新型的技 术已经在猪，牛，羊等多种家畜中实现其基因组的定点修饰，肉品质、生长速度、抗病能力等关键生产性状的 基因改良也取得了一定的突破。 基因组编辑技术使得定点，高效率的大家畜基因改良成为可能，对推动转基 因动物产业发展具有重要的影响。 关键词：基因编辑技术；动物分子育种；研究进展 ｄｏｉ：１０．１３３０４／ ｊ．ｎｙｋｊｄｂ．２０１４．００３ 中图分类号：Ｑ７８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１００８⁃０８６４（２０１４）０１⁃００３２⁃０７ Ａｄｖａｎｃｅ ｉｎ Ｇｅｎｏｍｅ Ｅｄｉｔｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ｆｏｒ Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ Ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ＷＥＩ Ｊｉｎｇ⁃ｌｉａｎｇ，ＷＵ Ｔｉａｎ⁃ｗｅｎ，ＲＵＡＮＪｉｎ⁃ｘｕｅ，ＭＵ Ｙｕ⁃ｌｉａｎ∗ （Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１９３，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｇｅｎｏｍｅ ｅｄｉｔｉｎｇ ｉｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｗｈｉｃｈ ｅｎａｂｌｅｓ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｇｅｎｏｍｅ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ． Ｉｔ ｃａｎ ｂｏｏｓｔ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ，ｒｅａｌｉｚｅ ｋｎｏｃｋｏｕｔ ｌｉｖｅｓｔｏｃｋｇｅｎｅ ａｎｄｆｉｘ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ． Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，ｚｉｎｃｆｉｎｇｅｒ ｎｕｃｌｅａｓｅｓ （ＺＦＮ），ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ａｃｔｉｖａｔｏｒ⁃ｌｉｋｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｎｕｃｌｅａｓｅｓ（ＴＡＬＥＮ）ａｎｄ ｂａｃｔｅｒｉａｌ ｃｌｕｓｔｅｒｅｄ ｒｅｇｕｌａｒｌｙ ｉｎｔｅｒｓｐａｃｅｄ ｓｈｏｒｔ ｐａｌｉｎｄｒｏｍｉｃ ｒｅｐｅａｔｓ （ＣＲＩＳＰＲ） ａｄａｐｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｉｔｙ ｓｙｓｔｅｍ， ｈａｖｅ ｂｅｅｎ ｕｓｅｄ ｔｏ ｃｌｅａｖｅ ｔｈｅ ｄｏｕｂｌｅ⁃ｓｔｒａｎｄ ＤＮＡ ａｔ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｓｉｔｅ，ｆｏｌｌｏｗｅｄ ｂｙ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ＤＮＡ ｒｅｐａｉｒ，ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｌｅａｄ ｔｏ ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｒｅｐａｉｒ ａｎｄ ｎｏｎ⁃ ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ｅｎｄｊｏｉｎｉｎｇ．Ｔｈｅｓｅｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ，ｍａｋｅｐｒｅｃｉｓｅｃｈａｎｇｅｓｔｏｔｈｅＤＮＡｏｆｌｉｖｉｎｇｃｅｌｌｂｙ ｋｎｏｃｋｉｎｇｏｕｔ ａ ｇｅｎｅ，ｆｉｘｉｎｇ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｏｎ ｏｒ ｒｅｐｌａｃｉｎｇ ＤＮＡ ｆｒａｇｍｅｎｔ ａｔ ｔｈｅ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｓｉｔｅ． Ｍａｎｙ ｂｒｅａｋｔｈｒｏｕｇｈｓ ｈａｖ