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符合国标的三聚氰胺液相色谱检测法－采用C8 柱分离 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 LC1620 高效液相色谱仪（含UV1620 紫外-可见检测器1 台，P1620 高压恒流泵1 台，上海 舜宇恒平科学仪器有限公司）；FA2004 电子分析天平（上海舜宇恒平科学仪器有限公司）； 三聚氰胺标准品(99%，上海安谱) ；辛烷磺酸钠(分析纯) ；柠檬酸(分析纯) 、乙腈(色谱纯， 美国Tedia)、纯净水(杭州娃哈哈) 。 1.2 标准品溶液配制 精密称取三聚氰胺标准品，溶于50% 甲醇水溶液，配制成1.0mg/mL 的标准储备液，于4 ℃ 避光保存。根据实验需要，用流动相逐级稀释成适当浓度的标准工作液。 1.3 样品前处理 按GB/T 22388—2008 进样样品前处理。 1.4 色谱条件： 色谱柱： Venusil C8 5μm(ID4.6mm×250mm) 流动相：乙腈/离子对缓冲试剂=10/90 （离子对缓冲试剂：按GB/T 22388—2008 配制） 流速：1.0ml/min 波长：240nm 柱温：40 ℃ 进样量：20μl 2 实验结果 2.1 精密度实验 取浓度为0.8μg/mL 三聚氰胺标准工作液，按上述色谱条件，连续进样6 次，以各成分峰面 积计算RSD(%) ，保留时间相对标准偏差（RSD ）为0.20 ％，峰面积RSD 为0.92 ％。 8.00 [mAU] 6.20 e n i m a 8 4.40 l 6. e 1 M 1 2.60 0.80 -1.00 0.00 2.50 5.00 7.50 10.00 12.50 15.00 17.50 20.00 22.50 25.00 [min] 图1 三聚氰胺标准品色谱图 2.2 标准曲线 配置浓度分别为0.8、2 、20 、40 、80μg/mL 的三聚氰胺标准工作液。将以上5 种标准工作液 实验室资讯网 http://www.L 在上述色谱条件下按浓度由低至高进样。以峰面积 (横坐标X 轴，μg/mL)对标准品浓度 (纵 坐标Y 轴)进行线性回归，求算标准曲线，结果如下： 2.3 加样回收率和重现性实验 取已知三聚氰胺含量的牛奶样品，加入一定量的标准储备液，按“样品前处理”操作，平 行制备3 份，得到样品溶液后按上述色谱条件进样分析，得到加样回收率及重现性结果，加 样回收率为102.1％，三次平行实验的结果RSD 为0..76 ％。 28.00 [mAU] 22.20 16.40 10.60 e n 4.80 i m a 2 l 6. e 1