SYBRGreenI实时PCR鉴定检测转基因油菜RT73品系.pdfVIP

安徽农业科学,Journal of Anhui Agri .Sci .2007 ,35( 10) :3010 - 3011 ,3138 责任编辑 陈娟 责任校对 胡先祥 R○ SYBR Green I 实时PCR 鉴定检测转基因油菜 RT73 品系 1 1 1 2 * 于莉, 熊国华 , 刘志恒, 曹际娟 ( 1. 沈阳农业大学, 辽宁沈阳11016 1;2 . 辽宁省出入境检验检疫局, 辽宁大连 116001) 摘要 利用特殊性引物, 应 用SYBRR○ Green I 实时PCR 技术鉴定检测 了商业化种 植 的转基 因油菜 RT73 品 系。结果表 明, 应 用实时PCR 技术, 利用SYBRR○Green I 染料 能选择性结合双链 DNA 的特点, 可检测到RT73 品 系特异性靶序列扩增所产生的荧光信号, 且通过溶解 曲 线确定其熔点值为(80 .2 ±0 .5) ℃, 而对其他油菜品 系则检测不到荧光信号。SYBRR○Green I 实时PCR 能通过溶解 曲线有效地 区分了特异 性产物、非特异性产物 以及 引物二聚体, 是基 因鉴定检测的新方法。 关键词 SYBRR○ Green I 实时PCR ; 转基 因油菜;RT73 品 系; 鉴定 中图分类号 Q789 文献标识码 A 文章编号 0517 - 6611(2007) 10 - 03010 - 02 Identification for Genetically Modified Rape RT73 Line with SYBR○R Green I Real Ti me PCR YU Li et al ( Shenyang Agricultural University , Shenyang , Liaoning 110161) Abstract The genetically modified rape RT73 line with co mmerce planting was i dentified by applying SYBRR○Green I real-ti me PCR assays and using specific pri mers . The results showed that the SYBRR○Green I could selectively co mbine the characteristic of double chain DNA and identify fluorescence signal produced by sequence amplification of specific target of RT73 line , and confirmthe melti ng point of (80 .2 ±0 .5) ℃by melting curve , while the fluorescence signal in other rape lines didn’t be detected . The SYBRR○Green I real- ti me PCR could availably differentiate special or non-special products and pri mer di mers by melting curve , which is a new method for gene idenfification . Key words SYBRR○Green I real-ti me PCR ;Genetically modified rape ;RT73 Line ; Identification 转基因油菜RT73 是 Monsanto 公司的产品 。RT73 1994 年 RT73 进行品系鉴定检测, 而无需PCR 后 处理, 简化 了检测 鉴 在加拿大被批 准食 用, 1995 和 1996 年 分别在 美 国和 日本被 定步骤 , 降低 了检 测成本, 提高了检测 效率和特异性 。