血与尿中多组分儿茶素的电化学与紫外检测器串联高效液相色.pdfVIP

生生塑堕区芏盘点!塑!芏!爿墨!!鲞筮!塾坚!·!』旦竺!坚型：塾出坐鲢!塑o!：塑I!!：!!! ．检验技术． 血与尿中多组分儿茶素的电化学与紫外检测器 串联高效液相色谱分析方法 凌云赵云峰张珙昊永宁 茶叶中的主要活性成分足以儿茶素为主的黄烷醇类，其 酸酯4．28mg，分别置十10ml容量瓶中，加甲醇溶解，并稀 含量约【与茶多酚总量的70％～80％。了解儿茶素在体内的 释至刻度，混匀，作为标准储备溶液，于一20℃低温冰箱 动态过程有助于阐明其功效成分与健康效应的关系。由于 保存。 儿茶素进入机体后迅速吸收转化，在机体内广泛分布，使得 (二)实验条件 mm 组织样品中儿茶素的含量处于低水平，且生物样品的基质复 色谱柱：cAPCnLlHKc．sMG，4．6LD×150mm， cO 杂，高效液相色谱一紫外检测器法(HPT．c—uV)难以满足需要，5¨m(日本shiseitl0LTD)，紫外检测器枪钡4波长为210 6 为此有必要发展灵敏度高、特异性强的检测方法。鉴丁儿茶 nm，电化学检测器电位为0V”1，柱温30℃，进样量60 1％ 素具有较强的电化学特性，除了采用荧光…及化学发光”“ 斗l，流动相A为0．1％H3Po。的甲醇溶液，流动相B为0 检测外，许多研究采用电化学检测器分析血浆、尿液及组织 H，Po。的水溶液，流速为lml／min，血浆梯度洗脱程序”o见 中的儿茶素”引。笔者在已建立的茶叶中8种儿荣素 表l，尿液梯度洗脱程序见表2。 HPLc．uv方法的工作基础上…，采用电化学检测器串联技 术，开展生物样品中儿茶素的HPLc分析方法研究，为开展 表l血浆梯度洗脱程序表 儿茶素的人体吸收利用试验提供可靠的分析手段。 时间(一) 流动相A(％) 流动柏B(％) 一、材料与方法 (一)主要仪器与试剂 1．主要仪器：高效液相色谱仪(配紫外检测器和电化学 检测器，美国A舀lem公司)，分析天平(1／10万)，超纯水器 PIlre (Easyuv／uF美国BamBte且d公司)。 2．主要试剂：儿茶索[(一)-catechin，c]、表儿茶素 [(一)一epicatechin，Ec]、没食子儿茶素[(一)一gallocaIechin， Gc]、表没食子儿茶素[(一)一e讲galloc砒echin，EGc]、儿茶素 没食子酸酯[(一)一cateching甜late，cc)、表儿茶素没食子酸 时间(mn) 流动相A(％) 流动相B(％) O 20 80 酯[(一)一印icateclli“gallate，EcG]、没食子儿茶素没食子酸 酯[(一)一蛐locatechingallate，GcG]、表没食子儿茶素没食 9 20 80 18 29 7l J 8种标准品 子酸酯[(一)一8p培allocatechingallale，EGcc 25 29 71 (si鲫a公司)，B—D-葡萄糖苷酸酶(p—Glucumnidase，G_7896，