实验环境与人体表面微生物检查.docVIP

实验一：实验环境和人体表面微生物检查 班级：生命科学院00级 姓名：00 学号：000000000000 同组人：00 【实验目的】 1.证实实验环境与人体表面有微生物； 2.体会无菌操作的重要性； 3.观察不同类群微生物的菌落形态特征。 【实验原理】 如何使我们周围的微生物从“看不见”变得“看得见”呢？通过放大微生物个体，是我们能看见它们；另一种方法是通过“放大”菌落，是我们看到他们的存在。即通过培养的方法使肉眼看不见的单个菌聚集在固体培养基上，经过生长繁殖形成几百万个菌聚集在一起的肉眼可见的菌落，来检查实验室环境和人体表面微生物，从而使我们牢固树立无菌概念。 平板培养基含有细菌生长所需要的营养成分，当取自不同来源的样品接种于培养基上，在适宜温度下培养，每一菌体可以通过很多次细胞分裂而进行繁殖，形成一个可见的细胞群体的集落，称为菌落。 每一种菌落都有它自己的特点，例如菌落的大小，表面干燥或湿润、隆起或扁平、粗糙或光滑、边缘整齐或不整齐，菌落透明或半透明，颜色以及质地疏松或紧密等。因此可以通过平板培养基来检查环境中细菌的数量和类型。 【实验器材】 配培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂平板； 仪器及其他用品：酒精灯、500ml量筒、500ml锥形瓶、试管2、培养皿20、记号笔、火柴等。 【实验内容】 1.灭菌：高温蒸汽灭菌。 将锥形瓶用棉塞塞好、牛皮纸包好，培养皿十个一组包好，两只试管内装半管水，用棉塞塞好并用牛皮纸包好放入指定仪器中灭菌。 2.倒平板 右手持盛培养基的锥形瓶置酒精灯火焰旁边，用左手将瓶塞轻轻拔出，瓶口保持对着火焰；左手持培养皿并将皿盖在火焰旁打开，迅速倒入培养基15ml，加盖后轻轻摇动培养皿，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。 3.采集微生物 左手持试管，用右手手掌边缘及小指拔出试管塞，将棉签浸入无菌水浸湿，在选取的地点擦拭。左手持培养皿在火焰附近打开，用棉签在平板上涂抹。完毕后平置于桌面。 空气中6套（3套5分钟，3套10分钟）； 桌面上3套； 洗手前3套，洗手后3套； 自选3套（本组选十元纸币）。 【实验结果】 表格一： 样品来源 特征描写 菌落数 记录人 空气10min 37℃ 小②黄色③表面湿润 ④上表面凸起，圆形⑤边缘整齐 6 空气5min 37℃ 中等②黄色③表面湿润 ④上表面凸起，近圆形⑤边缘整齐 4 洗手前27℃ 小②黄色③表面湿润 ④上表面凸起，圆形⑤边缘整齐 5 空气10min 37℃ 中等②乳白色③表面湿润 ④表面扁平⑤边缘锯齿状 6 钱37℃ 大②黄色③表面湿润 ④上表面凸起⑤边缘锯齿状 3 桌面37℃ 小②橘红色③表面干燥 ④上表面凸起，圆形⑤边缘整齐 12 来源 数量 种类 空气10min37℃ 20 4 空气5min37℃ 16 5 洗手前37℃ 32 4 洗手后37℃ 多 3 桌面37℃ 多 4 桌面27℃ 多 3 来源 菌数 特征 A2-4-空气-5min-37℃ 2 小②乳白色③表面湿润 ④中央有凸起⑤边缘不规则 B2-5-空气-5min-37℃ 1 同上 【课后思考题 】 1.思考一：列举2-3类微生物，说明它们在本实验条件下（肉膏蛋白胨琼脂平板，37℃）不能生长。 因为牛肉膏蛋白胨培养基是用来培养细菌的,故不能培养真菌,例如:霉菌,酵母菌.其次实验是在37摄氏度进行，可能有些微生物不适合在此温度下培养。 2.思考二：比较各种来源的样品，哪一种菌落数和菌落类型最多？为什么？ 洗手后的菌落数最多，洗手后菌种减少，但抑制作用也减少，所以数量多，而其他取样的培养基虽然菌种数目多，但是各种菌间的抑制作用较强，限制了菌株的生长。 菌落类型为洗手前最多。因为手接触了很多细菌或霉菌，包括空气中的，都可通过手的接触进入培养基。 3．思考三：比较洗手前后菌落数的变化，谈谈你的体会。洗手后仍有少量细菌生长，你认为是什么原因？ 洗手前菌落数比洗手后菌落数少，但是菌种数目多。洗手前，多数菌落为霉菌，洗手后，大多数为小型细菌菌落，而且数量较多。猜测原因为，洗手前的平板，霉菌生长可能抑制了细菌生长，因而菌落数较少；洗手后，霉菌被除去，细菌生长不受影响，故细菌菌落较多。 4．思考四：完成本实验后，你是否已体会到我们生活在微生物的包围中？你如何体会“微生物既是我们的朋友又是我们的敌人”？ 自然界中菌类数量