遗传性凝因因子Ⅷ缺乏症两种新基因突变的确定-遗传性凝血.pdfVIP

维普资讯 芏 第 23卷第3期 ChiaJHematIMarch瑚 2．vnl23．No3 · 论 著 · 遗传性凝血因子Ⅷ缺乏症两种新基因 突变的确定 段宝华 王鸿利 储海燕 王学锋 璩斌 李稻 王红 尹俊 康文英 王振义 摘【要】 目的 探讨遗传性凝血因子Ⅷ(FⅫ)缺乏症的基因缺陷：方法 采用PCR、核苷酸测序 的方法对两个遗传性 FⅫ缺乏症家系先I正者及其亲属外周 白细胞基因组DNA的FY,IA基因进行检 删 ．并用RT-PCR检测先证者外同血[J细胞F瑚A基因 n~LNA水平；,a．RMS-PCR对 60名正常人外周血 白 细胞基因组DNA的F珈A基因进行检测一结果 ①发现两种新的基因突变，先证者 1在第 1241位核 苷酸由C突变为G，位于外显子 10，导致 Ser413~Trp(Toc_+TGG)．先证者 2及其妹妹在第 232位棱苷 酸由C突变为T，位于外显子3，导致 7-+c悄(ccc-+Tcc)．均为单碱基突变，无限制性内切酶酶切 位 的改变；先证者 1的父母及先证者2的父、母 、舅则分别在DNA水平相同位点呈杂合状态。②采 用ARMS-PCR法分析正常人群未发现这嘣种突变的存在：@患者血浆存在少量FⅫA，而FⅫA基因在 auqNA水平几乎没有变化：结论 这两例 F蜘缺乏症患者均由于f瑚A基因缺陷造成：患者的fⅫA 在细胞内不稳定、易降解可能是FⅫ缺乏的原因。家系 1的突变位点在FⅫ的棱心区，对其结构功能的 影响较为明显。而家系2的突变位点位于FⅫ的表面．可能对蛋白的空间结构产生影响： 【关键词】 遗传性凝血因子Ⅷ缺乏症；基因突变 Identificationoftwonovelmutation intwoChinesehereditarycoagunitimlfactorⅫ deficiencybmⅢes ． DUA,V胁 ，WANGHortgli，CHUHaiya~2．gAS；G ．OLBin．1lDao，ff；4NGftong．m ． Wen)4ng，WANG踟 ．ShangtmiInstitute。厂Hema~dogy， Hospi~ ．Sha,~ S~ondMedical￡ 胛． S~anghai 200025，China A【hstraet】 Objective ToexploregenedefeetofhereditmycoagulationfactorⅫ deficiency Methods PCRand nesequencingorARMS-PCRwe usetltodetectt fⅪIAgeneofperipheralwhitebloodcell(PBC) fromtwoChinesehereditarycoagulationfactorⅫ deficiencyfamilymemkersand6onormal8 cetsrespectively ThelevelofFY,IAgenernRNAwastestedbyRT-PCR Results ①Nucelotide uen。atmlysisofthetwopp3一 bands’andtheirfm~filvmeml~rs’DNArevezlde tlmtall thethieepatientshadhomozygousmissensemulafionin FY,IAsubmhtgene．Pmband1hadaCtoGtrarLs[tionatnileleotident)1241ineXOtl10andprobade 2andhis sisteraCtoTtransitionatnt232in~XOtl3ofF瑚 Agene．whichresultde inthesubstitutionofSet413 ll】Tip andArg77wjll】Cys，respectively．Familysmdy~owedthatthe“岫 mutationsw髓einherite