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第9期（总第256期) 农产品加工·学刊 No.9 文章编号：1671-9646（2011）09-0008-04 响应面法优化短杆菌素的发酵 * 张宇光，姜 鹭，任发政， 郭慧媛 （中国农业大学食品与生物工程学院，北京100083） 摘要：为了提高短芽孢杆菌BacillusBrevis（ATCC8185）发酵液中的短杆菌素产量，采用一系列 酵培养基及培养条件进行了优化。先用Plackett-Burman设计从8个因子中筛选出对短杆菌素产 再用最陡爬坡试验确定3因素的取值范围，最后使用中央组合设计及响应面方法进一步优化。通过优化过程筛选出 的影响因素取值为：酪蛋白胨10.28g/L，NaCl4.62g/L和酵母浸粉11.03g/L。在此优化培养条件下，发酵液中短杆 菌素的质量浓度从优化前的265.32μg/mL提高到594.50μg/mL。 关键词：短杆菌素；短芽孢杆菌；优化；响应面分析 中图分类号：Q815 文献标志码：A doi： FermentationofTyrothricinbyResponseSurfaceMethodology ZhangYuguang，JiangLu，RenFazheng，*GuoHuiyuan Abstract： μg/mLto594.50μg/mLis achievedwithintheoptimizationprocedure. Keywords： 短杆菌素是由短芽孢杆菌产生的混合多肽，主 指出所优化众多因子的交互作用。因此对于多因子 要包括直链短杆菌肽和环状短杆菌酪肽，它们主要 优化试验，使用响应面的方法可同时对影响产物产 起到抗革兰氏阳性菌活性的作用。直链短杆菌肽由 量的各因子水平及其交互作用进行优化与评价，从 15个氨基酸以L-构型和D-构型交替组成，因为其而有效快速地确定多因子系统的最佳条件。在生物 独特的化学结构，可以形成离子选择性膜通道，被 技术众多领域研究中，响应面的方法已经得到了广 认为是研究膜蛋白结构有力的工具。 泛应用。 许多文献表明，培养基组分，尤其是氮源类物 本试验通过优化发酵短芽孢杆菌的培养条件， 质以及培养条件，如氧分压浓度，能够很大程度上 以期获得较高的短杆菌素产量。 影响短杆菌素的产量。现在对短芽孢杆菌发酵条件 试验和最陡爬坡试验的基础上，采用响应面分析方 的优化一般采用单因子试验法，仅能比较各因素已 法，对筛选所得到的影响短芽孢杆菌产短杆菌素的 选定水平的优劣，但在考察的因素较多时，这些方 重要因素进行优化，确定较优的发酵条件，以备为 法不仅要求的试验次数多，耗时、耗力，而且不能 后续的放大试验提供依据。 收稿日期：2011-05-03 基金项目：国家 “863”计划项目（2009BADB9B06） （2011AA100903）。 作者简介：张宇光（1987- ），男，山西人，硕士，研究方向：乳品微生物。E-mail：biddy1019@126.com。 *为通讯作者：郭慧媛，女，讲师，博士。E-mail:guohuiyuan99@。 2011年第9期 张宇光，等：响应面法优化短杆菌素的发酵 ·9 · 1.5.2 最陡爬坡试验 1 材料与方法 只有在考察的紧接邻域里，响应面的拟合方程 1.1 试剂 才可以充分近似真实结果，因此需要先逼近最大目 标准短杆菌素（Tyrothricin），购自Mpbio公司，