实验四福医大白细胞计数、网织红细胞+计数、血沉.pptVIP

一、显微镜白细胞计数 8.临床意义 白细胞在生理或病理情况下均可有差异。多数 与中性粒细胞数量变化一致。 二、网织红细胞计数（临检指导P26） 1.原理 网织红细胞（Ret）是晚幼红细胞脱核后到完全成熟的 红细胞间的过渡细胞。其胞质中残存核糖核酸等嗜碱性物 质，故经煌焦油蓝/新亚甲蓝染液活体染色后，可见有蓝绿 色点状、线状、颗粒状或网状结构，故名网织红细胞。 （5）也可用米勒氏窥盘（Miller oculordisc）置入接目镜内 进行计数（如下图）。 具体方法是以窥盘的A区计数红细胞，B区计数网织 红细胞，由于B区的面积为A区的9倍，故计算如下： 网织红细胞（%）=B区网织红细胞数/ A区红细胞数 ×9 ×100% 网织红细胞 二、网织红细胞计数 7.质量控制 1.显微镜法 网织红细胞目视计数误差较大，影响因素主要有： 操作人员对网织红细胞认识不同；血涂片质量好坏， 计数红细胞数量的多少和计数方法等。 三、血沉测定 2．方法 （1）取静脉血1.6ml，加入含109mmol/L枸橼酸钠0.4ml 的抗凝管中混匀。 （2）吸血入血沉管中至刻度“0”处，将血沉管直立于血 沉架上。1h后观察结果。 三、血沉测定 3.参考值 ＜50岁：男性0~15mm/h 女性0~20mm/h * * 实验四 白细胞计数、网织红细胞计数及血沉测定 目的 1．掌握显微镜白细胞计数的方法。 2．掌握网织红细胞手工计数的方法。 3．血沉测定（示教）。 一、显微镜白细胞计数（临检指导P32） 1. 概述 ▲人外周血白细胞 单核细胞 白细胞 淋巴细胞 中性分叶核粒细胞 粒细胞 中性杆状核粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 一、显微镜白细胞计数 2．原理 用白细胞计数稀释液（2%冰醋酸加入1%美 蓝或结晶紫数滴）0.38ml，将血液（20μl）稀释20 倍，在破坏成熟红细胞的同时固定白细胞，后充入 改良牛鲍计数板，在低倍镜下计数四角4个大方格 内的白细胞数，经换算求得每升血液中白细胞数。 一、显微镜白细胞计数 3.操作步骤 （1）加稀释液 ：白细胞稀释液0.38ml （2）稀释血液：末梢采血20μl，加入稀释液中混匀 （3）溶血 ：混匀后静置，待液体变为棕褐色 （4）充池：同红细胞计数 （5）计数：低倍镜下计数四角4个大方格内白细胞总数。 一、显微镜白细胞计数 4.计算 WBC=N/4×10×20×106=N/20×109/L 5.参考值 成人： （4~10）×109/L 初生儿： （15~20）×109/L 6月~2岁： （11~12）×109/L 6.注意事项 （1）器材：微量吸管及牛鲍计数板的校正 （2）标本采集和稀释应准确 （3）加盖玻片方式： WHO推荐“推式”法 （4）充液的影响：同红细胞计数 （5）计数原则 一、显微镜白细胞计数 （6）计数室内的细胞分布要均匀：各大方格间细胞 数相差不超过10%，否则应重新重池。 （7）调整计数白细胞的数量或稀释倍数:细胞数量过 少，可扩大计数域(计8或9个大方格)或加大取 血量；细胞数量过多，可增加稀释液至0.79ml 或仅加血10μl。 （8）去除有核红细胞的影响 ： 实际白细胞数/L=100×校正前白细胞数/ （100+有核红细胞） 7.方法学评价 显微镜计数法是传统的白细胞计数法，并可用 于校准血细胞分析仪，但其精密度和重复性欠佳。 用于校准血液分析仪时应在严格规范的条件下进行。 而校准的血液分析仪在严格规范的条件下，精密度和 准确性较高。 一、显微镜白细胞计数 血液分析仪检测速度快，适合大规模健康人群普查，但需特殊仪器，当某些人为或病理情况（如外周血有核红细胞、巨大血小板和血小板凝集等）可干扰白