发酵前半部分.pptVIP

第四组：酶制剂类  酸性蛋白酶生产工艺 小组成员：宁伟伟 何思卉 霍顺楹 苏春燕 朱峰燕 蛋白酶 蛋白酶： 催化肽键水解的一类酶，它可迅速水解蛋白质为胨、肽类，广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。同时大多数微生物蛋白酶都是胞外酶。 酸性蛋白酶制剂的性能 1 酸性蛋白酶的作用机理 2 A pH对酶活及酶稳定性的影响 B 温度对酶活性及稳定性影响 C 金属离子对酶活力的影响 3 酸性蛋白酶制剂酶活力定义 * 微生物蛋白酶 酸性蛋白酶 中性蛋白酶 碱性蛋白酶 碱性蛋白酶：透明褐色液体，能与水混溶，最适温度50~60℃，最适pH8.5。 中性蛋白酶：金属酶，褐色颗粒或液体，易溶于水，最适温度45~55℃，最适pH5.5~7.5。 酸性蛋白酶：近乎白色至浅黄色无定型粉末或液体，易溶于水，最适温度45℃，最适pH2.5。 酶的生产方法 提取分离法 生物合成法 化学合成法 微生物 合成法 液体 深层 发酵 固体 培养 发酵 固定化 细胞 培养 固定化 原生质 发酵 酸性蛋白酶用微生物发酵法生产，采用液体深层发酵 液体深层发酵 液体培养基在发酵罐中灭菌冷却后，接入产酶细胞，一定条件下发酵，适用于微生物细胞、动植物细胞的培养。具有机械化程度高、技术管理严格、酶产率高、质量稳定，产品回收率高的特点，是目前酶发酵的主要方式。 酶是一种蛋白质，它是活细胞产生的生物催化剂，生物体的新陈代谢活动都离不开酶的作用。酶的种类很多，酸性蛋白酶是水解酶类的一种，能够在微酸环境下（pH2．5～4．0）水解动植物蛋白质，通过内切和外切作用将蛋白质水解为小肽和氨基酸。 酸性蛋白酶稳定pH范围2.0～4.0之间，最适pH2.5，pH低于2．0、高于4．0将影响水解速度。 酸性蛋白酶适宜温度范围30℃～50℃，最适作用温度为50℃，低于40℃酶活稳定，超过50℃，酶活性损失严重。 酸性蛋白酶可被Mn2＋、Ca2＋、Mg2＋离子激活，被Cu2＋、Hg2＋、Al3＋离子抑制，液体酸性蛋白酶，长时间存放碳钢罐中失活较多。 酸性蛋白酶活力 是指1克固体酶粉或1ml液体酶，在45℃左右和pH2.5条件下，1分钟水解酪酸蛋白产生1微克酪氨酸即为一个酶活力单位。酸性蛋白酶45℃酶活力为50138U左右。 生产菌株的选择 目前已经用于生产酸性蛋白酶的微生物菌株有：黑曲霉、米曲霉、拟青霉、啤酒酵母、乳酸杆菌、枯草杆菌等，其中以黑曲霉为主，这些曲霉产生的蛋白酶有一定的耐酸性和耐热性。我国生产酸性蛋白酶的菌株有黑曲霉AS 3.301，AS 3.350等。 黑曲霉是曲霉属黑曲霉群霉菌，菌丝体由具有横隔的分支菌丝构成，菌丛黑褐色，顶囊大球形，小梗双层，分生孢子球形，平滑或粗糙。黑曲霉具有多种活性较强的酶系，如 CX 酶、淀粉酶、 酸性蛋白酶等， 可将原料中的纤维素等大分子化合物降解转化为动物易消化利用的养分，并为白地霉、酵母菌提供必需的糖、氨基酸等。黑曲霉可以用于生产多种酶，有胞外酶也有胞内酶，主要用于酸性蛋白酶等的生产。 *