北京地区规模化牛场BVDV持续感染牛清除方案初步实施.pdfVIP

418o201 o年学术年会 2．4重组蛋白Western blot鉴定 Western blot结果显示，重组菌株在60 kDa处出现深色的目的条带(图4)，由此证明，重组菌株在 60 kDa处表达的特异性蛋白条带即牛分枝杆菌PE_PGRS62重组蛋白。 3讨论 结核分枝杆菌表面的PE—PGRS家族蛋白被认为在结核分枝杆菌入侵以及在胞内存活中发挥重要作 用。经过基因测序、SDS．PAGE分析、Westernblot鉴定，结果证明重组PE—PGRS62蛋白在耻垢分枝杆 菌中获得高效表达。 耻垢分枝杆菌是一种非致病菌，且生长快速，无需异源启动子，是研究结核分枝杆菌基因的一种理 想宿主。我们选用的载体pMV261含有大肠杆菌和分枝杆菌的两种启动子，是一种大肠杆菌一分枝杆菌 穿梭表达质粒，能够在在这两种细菌中复制。它具有分子量较小、转化效率高、在分枝杆菌内比较稳定 等优点。这有利于我们将外源基因在其内进行表达。 本研究成功构建了表达PE．PGRS62蛋白的重组耻垢分枝杆菌，为进一步研究牛分枝杆菌PE-PGRS 62蛋白与宿主细胞的相互作用及其PE．PGRS