初中生物教学论文漂染废水对泥鳅红细胞核异常的诱导.pdfVIP

漂染废水对泥鳅红细胞核异常的诱导 【摘 要】 探究了漂染废水在不同体积分数和染毒时间对泥鳅红细胞核异常的影响.结果 表明,3 种不同体积分数的漂染废水均能诱发泥鳅红细胞核异常.从试验结论得出,泥鳅红细胞 的微核和核异常测定法可作为监测水环境中致突变化合物的一个较为实用的指标。 【关键词】 泥鳅红细胞 微核 核异常 漂染废水 随着工农业生产的迅速发展,水体污染问题日趋严重,尤其近年来漂染工业的蓬勃发展,水环 境日益恶化，已对水生动物及人类造成了极大的危害，污染物对水生动物及人类的影响已引 起人们的极大关注。因此,对污染水体中具有诱变和致癌活性的化学性质的检测显得十分重 要. 目前,除用理化方法对水体进行监测外,还可用生物学方法,如遗传学毒理学方法来检测不 同环境中污染物对遗传物质的损害及毒理效应,从不同角度评价它们对人类和生物造成的潜 在危害,其中比较简便迅捷而且敏感准确的检验方法为微核测定法(Micronucleus test)，该方 法已被广泛应用于评价各种理化因子的致癌、致突变效应及环境监测等。 微核测定法是二十世纪七十年代初建立起来的细胞遗传学方法之一. 由于微核与染色质的突 变具有较为密切的联系，所以长期以来微核被许多科研工作者用来评价毒物、放射性物质以 及细胞毒性物质对人、动物及体外细胞损伤的指标。Buckley 用水体中残留的氯成功地诱发 银大马哈鱼(Oncorhychus kisutch)红细胞微核的形成,这是最早报道的水体污染物诱发水生 脊椎动物的微核试验.Hooftman 等用化学诱变剂甲基磺酸乙酯诱发泥荫鱼(Umbrapygmaca)外 周红细胞微核的形成[1].近年, 国内学者用蝌蚪[2-4]、黄鳝[5]、泥鳅[1、6-11]等作实验动物, 检测具有诱变活性的污染物有污水、农药、除草剂等.但至今尚未见到漂染废水诱发鱼类微 核的报道.本探究使用工业上的漂染废水,探讨其不同体积分数和染毒时间对泥鳅红细胞微核 形成和核异常的影响,为保护水源,治理污染提供科学依据. 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 试验鱼 试验鱼为泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus),购自仙游中心市场,体长 8～11.5cm,体重2.5～4.5g, 实验前暂养在实验室经曝气的符合饮用水标准的自来水中,实验时挑选健康活泼和体表无损 的个体进行染毒处理.整个实验期间的水温范围为 13～25 ℃。 1.1.2 试剂 诱变剂:漂染废水,采自仙游某漂染厂。 实验用水:曝气后的仙游大济中学校区生活饮用水,符合国家饮用水标准。 1.2 方法 1.2.1 染毒 实验在 5 个 5L 饲养缸内进行,在预试试验( 以泥鳅在饲养阶段不出现行为、外形等的明显异 常为标准) 的基础上,将废水配制成体积分数为 10％、20 ％、40 ％三个试验组,另设一不加废 水的对照组.对照组和每一试验组均投放 15 尾泥鳅。 1.2.2 血涂片制备 对照组和不同体积分数的试验组分别于染毒后的 6、12、24 、48 ｈ取3 尾泥鳅,断尾取血,制 备血涂片.涂片晾干后, 甲醇固定 1min,用磷酸缓冲液(pH 值为 6.4)稀释的 Giemsa 液(9:1)染色 15～25min,蒸馏水冲洗，晾干。 1.2.3 血涂片观察 血涂片置于油镜下观察,每试验组随机观察 3 张涂片，每张血涂片随机观察 1000 个以上红细 1 胞,观察指标为微核和核质外凸、核内空泡、无丝分裂、核碎裂等各种类型的核异常,并统计 其微核及核异常细胞率,结果均以千分率(‰)表示。 微核细胞率=带有微核的细胞数/观察的细胞总数×1000‰ 核异常细胞数=核异常（微核除外）细胞数/观察的细胞总数×1000‰ 总核异常细胞率=微核细胞率+核异常细胞率 2 结果与讨论 2.1 急性毒性试验 泥鳅刚染毒时,在烧杯中急剧游动,四处乱窜,片刻后便趋于平静,伏于水底,胸鳍张开,鳃盖 启动.以后时常有泥鳅游到水面,头伸出水外,意欲跳出,此现象在高浓度较为明显.泥鳅中毒后, 严重者昏迷沉底死亡. 2.2 漂染废水诱发泥鳅红细胞微核和总核异常细胞率的观察结果 泥鳅正常红细胞多呈椭圆形,少数呈圆形,泥鳅红细胞因漂染废水诱发产生的微核位于胞 质中，为完全与主核分开的圆形或椭圆形微核，边缘清晰光滑，大