幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃复制大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变模型形态学观察及早期细胞凋亡分析【荐】.pdfVIP

幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃复制大鼠慢性萎缩性 1 胃炎癌前病变模型形态学观察及早期细胞凋亡分析 1 1* 2 2 3 2 2 张玉禄 ，李军祥 ，鲁香凤 ，戴欣 ，朱陵群 ，尹军祥 ，孙海芸 1 北京中医药大学东方医院消化内科，北京 （100078 ） 2 北京中医药大学东直门医院，北京 （100700 ） 3 北京中医药大学中医内科学教育部重点实验室，北京 (100700 ） E-mail ：lijx970508@ 摘 要：目的：研究幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃法复制CAG 癌前病变大鼠形态学及早 期细胞凋亡特征。方法：采用幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃法复制CAG 癌前病变模型， 用双标记流式细胞术分析 CAG 癌前病变大鼠细胞凋亡的特征。结果：光镜观察表明 CAG 癌前病变模型复制成功，CAG 癌前病变模型组大鼠早期凋亡率明显高于正常组（P0.01 ）。 结论：幽门弹簧插入配合高盐热糊灌胃法成功复制CAG 癌前病变大鼠模型, 细胞凋亡增强 可能是CAG 癌前病变的发病机理之一。 关键词：萎缩性胃炎，癌前病变，病理形态，流式细胞术，Annexin V ，大鼠 慢性萎缩性胃炎（Chronic Atrophic Gastritis，CAG ）是消化系统常见病、疑难病之一， 在 CAG 基础上伴发的肠上皮化生（Intestinal Metaplasia ，IM ）和异型增生（Dispalsia ， [1] 。从胃癌 II 级预防的角度注重对 CAG 癌前病变转归的研究,特别是 Dys ）是胃癌前期病变 建立类似人 CAG 癌前病变动物模型,在此基础上作干预阻断试验,寻找逆转癌变的方法,意义 重大。按赵凤志等[2] 的方法复制大鼠 CAG 癌前病变模型，从早期细胞凋亡角度对疾病模型 进一步分析，提高对疾病模型的认识。 1 材料 1.1 实验动物 雄性 Wister 大鼠，体重 180～220g，清洁级，由北京维通利华实验动物技术有限公司提 供。实验动物许可证编号：SCXX （京）2002-0003 。大鼠在相同条件下分笼饲养，每笼 5 只，常规喂养标准颗粒饲料，自由饮用水。 1.2 流式细胞仪及试剂 Annexin V-FITC 试剂盒(美国 BD 公司) ，碘化丙啶(PI) （美国Sigma 公司），Rnase A （美 国 Sigma 公司）。 1.3 动物实验技术条件 北京中医药大学东直门医院中药药理学实验室 II 级动物实验室，许可证号：SYXK 11-00-0029。 1.4 主要仪器 （1）TP-1000 电子天平，湘仪天平仪器厂。 （2 ）OLYMPUS B×51 显微镜，日本制造。 1本课题得到国家自然科学基金项目(No 的资助。 - 1 - （3 ）LEIKA RM2135 石蜡切片机，LEIKA ASP300 脱水机，德国制造。 （4 ）流式细胞仪:FACScalibur, 美国 BD 公司制造。 2 方法 2.1 大鼠 CAG 癌前期病变模型的建立 [2] 按赵凤志等 的方法，将雄性 Wistar 大鼠(体重 230～260g)禁食不禁水 16 小时后，以 1.0％戊巴比妥腹腔注射麻醉(0.5ml ／100g)，称重，固定大鼠四肢，在无菌条件下开腹，暴 露胃，在胃前壁距幽门环 0.2cm 无或少血管处切一小口，将一长约