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DNA银染检测方法的改进.pdf
第 31 卷第 5 期 2009 年 9 月
Vol. 31 No. 5 Journal of Tangshan Teachers College Sep. 2009
DNA 银染检测方法的改进
李天翊，张运峰，范永山
（唐山师范学院生命科学系，河北 唐山 063000 ）
摘 要：DNA 的聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE ）银染检测技术是分子生物学实验中的一个难点。对点样量、
固定时间、显色时间等因素进行了改进和优化，收到了较好的实验效果。
关键词：PAGE；银染；DNA 检测；影响因素
Q-331 A 1009-9115(2009)05-0058-02
中图分类号： 文献标识码： 文章编号：
Improvement of DNA Silver Staining Detection
LI Tian-yi, ZHANG Yun-feng, FAN Yong-shan
(Department of Life Science, Tangshan Teachers College, Tangshan Hebei 063000, China)
Abstract: Silver staining for DNA polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) is one important but difficult technique in
Molecular Biology. The influencing factors, inculding the quantity of sample application, stationary time, and imaging time, were
optimized for the PAGE/silver staining technique. The good experimental results showed that the improved method was feasible and
available.
Key words: PAGE; silver staining; DNA detection; influencing factors
分子生物学实验中 DNA 的检测技术主要是琼脂糖凝胶 方法操作时间太长。所以，我们以 Carlos 法为基础进行了改
电泳/ 溴化乙锭染色，但其灵敏度较差（最小检出量仅为 进和优化。
10ng），处于临界检测状态的DNA 片段表现不稳定，重复性 1 材料与方法
较差，而聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE ）/银染法，不但具有 1.1 试验材料
较高的检测灵敏度（可达 pg 级），且使用样品量少、不易扩 1.1.1 供试材料
散，易于观察，可以检测相差 1bp 的片段[1]，目前广泛应用 DNA Marker DL2000 （TaKaRa 公司）
[2]
在 SSR、SNP 等分子标记研究和遗传图谱构建等方面 。因 1.1.2 供试药品
此，该技术更适合于学生实验技术的训练。由于 PAGE/银染 （1）6%PAGE
技术比琼脂糖凝胶电泳/溴化乙锭染色法操作较复杂，而实 40% Acrilamide 胶储藏液：Acrilamide:
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