牛病毒性腹泻-黏膜病病毒斑点酶联免疫吸附检测法建立.pdfVIP

第 5期 【试验研究 】 9 牛病毒性腹泻一黏膜病病毒斑点酶联免疫吸附检测法 的建立 张 宁 ，赵月兰 2赵博伟 ，胡晓悦 4，吕炳起 ，‘刘军峰 (1．河北省畜牧兽 医研究所 ，河北 保定 071000；2．河北农业大学 ，河北 保定 071000； 3．河北省畜牧兽医局 ．石家厂F 050031：4．河北省动物疫病预防控制 中心 ，河j￡保定 071000) 摘要 ：采用辛酸一硫酸铵法提取免抗 BVDV高免血清中的免疫球蛋 白IgG，在混合硝酸纤维素膜上进行间 接酶联免疫吸附试验 ．建立 了检测 BVDV抗原的斑点酶联免疫吸附检 测法。结果显示 ，抗体 最佳 包被 量 为400txg／mL．酶标记羊抗免IgG的最佳工作浓度是 1：500倍稀释，抗原最小检 出量是 5．361~g／mL。应用 建立的检测方法对 78份腹 泻奶牛血样进行 了检测 ，阳性栓 出率为 58．97％；经卡