扩增核糖体DNA限制性分析ARDRA的研究刺芹侧耳细菌病原菌.pdfVIP

1005-9873(2012)01-0070-05 扩增核糖体DNA限制性分析(ARDRA) 研究刺芹侧耳细菌病原菌 唐利华 高君 辉尚晓冬 章炉军 李 玉 谭琦 上海市农业科学院食用菌研究所，农业部南方食用菌资源利用重点实验室，国家食用菌工程技术研究中心， 国家食用菌加工技术研发分中心，上海市农业遗传育种重点开放实验室，上海201403 摘要：为分析刺芹侧耳 （Pleurotuseryngii）工厂化栽培中发黄腐烂子实体的细菌组成,构建16SrDNA文 库，利用限制性内切酶MspI和RsaI分别对随机克隆进行酶切筛选，并测定代表性克隆16SrDNA序列， BLAST分析结果表明刺芹侧耳子实体病状组织中存有两类菌群，分别为假单胞菌和芽孢杆菌属。同时,对刺 芹侧耳子实体病状组织中的细菌进行分离培养、致病性测定、16SrDNA鉴定及BLAST分析，病原细菌与恶臭 假单胞菌 （Pseudomonasputida）的同源性较高，其作为引起刺芹侧耳工厂化栽培细菌性病害的病原菌在国内 外尚属首次报道。 关键词：刺芹侧耳；工厂化栽培；细菌病害；克隆文库；16SrDNA基因序列 2011-10-03 2011-10-22 上海市农业科学院青年基金[编号：农青年科技2008(05)]的部分研究内容 作者简介：唐利华 （1978-），男，上海交通大学在读博士，助理研究员，主要从事食用菌生理和栽培等工作。 试菌株与上述构建的16SrDNA克隆文库中的 16SrDNA系统发育树 DNAsequences @@[1]黄年来.一种市场前景看好的珍稀食用菌-杏鲍菇 [J].中国食用菌，1998，17(6):3-4. @@[2]高君辉.杏鲍菇工厂化栽培技术要点[J].食用菌, 2001,23(5)：34. @@[3]陈平，毕绍波，张敏.智能控制菇房环境栽培杏鲍菇的 技术研究[J].食用菌，2004，26(5):23-24. @@[4]WANGP,WANGFP,XUMX,etal.Molecular phylogenyofmethylotrophsinadeep-seasediment fromatropicalwestpacificwarmpool[J].FEMS MicrobiolEcol,2004,47:77-84. @@[5]李国媛，李俊，姜昕，等.应用16SrDNA克隆文库法 分析有机物料腐熟菌剂细菌组成[J].微生物学通报, 2007,34(5)：939-942. @@[6]SOLER-RIVASC,JOLIVETS,ARPINN,etal. Biochemicalandphysiologicalaspectsofbrown blotchdiseaseofAgaricusbisporus[J].FEMS MicrobiolRevs,1999,23:591-614. @@[7]IACOBELLISS,LOCANTOREP.Recenti acquisizionisuldeterminismodellabatterriosidel cardonecello(Pleurotuseryngii)[J].Agricoltura Ricerca,1998,176:51-54. @@[8]FILIPPIC,BAGNOLIG,BEDINIS,etal. Ulterioristudisulleziologiadella,bactteriosidel cardoncello[J].AgricolturaRicerca,2002,188: 53-58. @@[9]RUSSOA,FILIPPIC,TOMBOL1NIR,etal. Interaction between gfp-tagged Pseudomonas tolaasiiP12andPleurotuseryngii[J].MycolRes, 2003,158:265-270. @@[10]RAINEY,PB.EffectofPseudomonasputidaon hyphalgrowthofAgaricusbisporus[J].MycolRes, 1991,