羧甲基壳聚糖中氨基葡萄糖含量测定方法第研究.pdfVIP

维普资讯 第 34卷 第 5期 中 国 海 洋 大 学 学 报 34(5)：811～815 2004年 9月 PERIODICAL OF OCEAN UNIVERSITY 0F CH INA Sept．，2004 羧 甲基壳聚糖中氨基葡萄糖含量测定方法的研究’ 韩宝芹，刘万顺 ，崔丽华2，贺 君 ，孙明昆 (1．中国海洋大学，山东 青岛266003；2．山东省药品检验所，山东 济南 250012) 摘 要 ： 以乙酰丙酮试剂结合分光光度法和以盐酸氨基葡萄糖为对照品，确定羧 甲基壳聚糖的氨基葡萄糖含量测定方 法。羧甲基壳聚糖在 6mol／LHC1、120(2条件下水解 2．5h，羧甲基壳聚糖水解样品溶液，效果较好 ；盐酸氨基葡萄糖对照品 溶液和羧甲基壳聚糖水解样品溶液中的氨基葡萄糖与 乙酰丙酮试剂进行定量反应，使溶液呈色，采用分光光度法进行定 量分析，两者最大光吸收波长均为 525nm，线性关系 良好；该方法对氨基葡萄糖有较好的专属性 、精密度和稳定性。可用 于羧甲基壳聚糖的氨基葡萄糖定量分析。 关键词 ： 羧 甲基壳聚糖 ；氨基葡萄糖；乙酰丙酮 ；分光光度法 中图法分类号 ： P714 ．5；R318．08 文献标识码 ： A 文章编号 ： 1672—5174(2004)05—811—05 近年来，甲壳质 (chitin)以其仅次于纤维素的丰富 氨基葡萄糖含量分析。 资源和独特的结构、功能，越来越受到各国的重视 。作 为深层次产品的研究和开发，脱乙酰基的壳聚糖和衍 l 材料与方法 生化的羧甲基壳聚糖不仅在制药、生物医用材料行业 用途广泛[卜，在健康食 品、化妆品等行业也有大量的 1．1材料 羧 甲基壳聚糖 (本实验室 自制，并经过结 研究和开发报道l5]。羧 甲基壳聚糖作为 1种衍生化水 构确证)[，盐酸氨基葡萄糖 (中国药品生物制品检定 溶性功能多糖，应用范围正在扩大，因此需要建立其产 所对照品)，其它试剂均为国产商品试剂，分析纯。 品质量分析方法，以便于进行质量控制。 1．2主要仪器 紫外可见光分光光度计 Tu一1800S， 关于羧 甲基壳聚糖 的含量测定，目前 国内外 尚没 北京普析通用仪器有限责任公司产品。 有专属性测定该多糖 的标准对照品和成熟方法，因此 1．3实验方法 无法用 HPLC方法进行定量分析。考虑到该多糖在结 1．3．1主要试剂的配制 乙酰丙酮溶液 ：取 乙酰丙 构上属葡萄糖胺聚糖，在糖化学分析中已有成熟较专 酮 3．5mL，加 lmol／L碳酸钠溶液至 50mL，混匀，临用 一 测定糖醛酸 的硫酸咔唑法和葡萄糖胺的 乙酰丙酮 前配制。对一二 甲氨基苯 甲醛溶液 ：取对一二 甲氨基苯 甲 法。本研究在采用化学分析法测定该多糖的糖含量 醛 0．8g，加无醛 乙醇 15mL及盐酸 15mL，摇匀备用。 时，对 已有的糖含量测定方法如酚一硫酸法、蒽酮法 、硫 1．3．2盐酸氨基葡萄糖对照品溶液的制备 精确称 酸咔唑法 、乙酰丙酮法等进行 了专属性、灵敏性 、稳定 取 105℃干燥至恒重的盐酸氨基葡萄糖对照品 30mg， 性的考察，结果表 明乙酰丙酮法适合本 多糖含量测 置50mL量瓶 中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，摇匀。 定～ ，故采用乙酰丙酮试剂结合分光光度法作为羧 甲 精密取 5．0mL，置 100mL量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇 基壳聚糖的氨基葡萄糖含量测定方法。 匀，即得盐酸氨基葡萄糖对照品标准溶液 (每 mL中含 羧 甲基壳聚糖的氨基葡萄糖含量测定的方法是参 盐酸氨基葡萄糖