液相色谱仪最小检测浓度与定量测量重复性的测量不确定度.docVIP

液相色谱仪最小检测浓度和定量测量重复性的测量不确定度 测量方法（依据JJG 705--2002） 液相色谱仪依据国家计量检定规程JJG705—2002《液相色谱仪》进行检定，其中紫外-可见光检测器、二极管阵列检测器均需测量最小检测浓度，整机还需检定定性测量重复性及定量测量重复性。 紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器浓度的测量方法：选用色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min，紫外检测器的波长选在254nm，检测灵敏度调在最灵敏档，记录纸速调至5—10cm/min（使用工作站的设置好相关参数）。开机预热，待仪器稳定后记录30min，由检测器的衰减倍数和测得的基线峰—峰高对应的记录仪标度，按公式=KB计算基线噪声。保持操作条件，用微量注射器从进样口注入10～201×的萘/甲醇溶液，打印的色谱图及相关数据或记录色谱图并测量计算相关数据，由色谱峰高和基线噪声峰—峰高，计算最小检测浓度(按20L进样量计算)。 整机定性、定量重复性的测量方法：将仪器各部分连接好，选用色谱柱，根据仪器配置的检测器，选择流动相和测量参数：紫外检测器和二极管阵列检测器用100%甲醇为流动相，流量为1.0mL/min,,检测波长为254nm，灵敏度选择在0.04左右，基线稳定后由进样器注入5--10L的萘/甲醇标准溶液；连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，计算相对标准偏差。 数学模型 最小检测浓度 （1） 2.2 定性、定量重复性 × 方差和灵敏系数 方差 （3） 灵敏系数 （9） 最小检测浓度的不确定度分析与计算 标准不确定度分量的分析和计算 输入量标准溶液浓度定值c的标准不确定度u(c)的分析和计算 输入量c的标准不确定度u(c)主要来源于标准溶液浓度定值的标准不确定度，采用B类评定方法进行评定。根据定值证书给出的定制不确定度，按进样量20计算。不同检测器所用的标准物质不同及浓度不同，根据计算可得结果列于表1： 表 1 检测器名称 紫外-可见光检测器二极管阵列检测器 标准物质名称 萘/甲醇溶液 标准物质浓度（g/mL） 证书给出U(k=2) (%) 4 U(c) (g/mL) 4.1.2输入量进样体积V的标准不确定度u(V)的评定 标准物质的进样器一般为玻璃微量注射器，根据有关技术资料，玻璃微量注射器由于环境条件（如温度）及人员操作的不同，引起的误差一般不超过1%，认为服从均匀分布。各种不同的检测器，进样量按20计，则得： 输入量基线噪声N的标准不确定度的分析和计算 输入量N的标准不确定度主要来源于检测器工作稳定性等因素，基线噪声是仪器正常工作状态下，不进样品连续记录60分钟，然后选取60分钟内最大的一个峰谷，量取它的高度。采用A类方法评定。 这里为评定方便，仅以紫外-可见光检测器和二极管阵列检测器为例，将基线图谱均分为6段，取各段噪声最大峰得0.063mV、0.062 mV、0.057 mV、0.052 mV、0.053 mV、0.054 mV。平均值为0.05683 mV由公式： = = 得： 实际校准时应按实测值计算。另外如果是用绘图仪出色谱图的，则需使用卡尺量取，因此还需考虑卡尺带来的不确定度。现在我们使用规格200mm分度为0.01mm（精度为0.02mm）的数显卡尺，经查有关资料，该种卡尺的有关不确定度U=0.01mm,置信概率p=95%，自由度∞ ，。选一张图谱，量得0.5mV坐标为68.44mm，则 (0.5mV/68.44mm)×0.006mm=4.383×mV 卡尺带来的不确定度相对较小，可忽略不计，则： 输入量峰高H的标准不确定度u(H)主要来源于进样系统性能和进样操作方法、分离柱性能、柱相温度稳定性、检测器信号转换性能、信号处理电路、积算器（绘图仪）或色谱数据处理机或色谱处理工作站（A/D转换、量化误差）等因素，最终表现在峰高的不重复性，可采用A类方法评定。 根据不同的检测器，分别选用性能较好的液相色谱仪，按规程要求设置好最佳工作状态，分别重复进样10次，每次进样10得到相应10次的峰高及计算得到相应的标准偏差列于表2： 表 2 检测器 H1 H2 H3 H4 H5 H6 H7 H8 H9 H10 紫外 2.015 2.078 2.048 2.087 2.069 2.092 2.024 2.036 2.076 20.64 平均值 紫外 2.0589 单次标准偏差 0.026789 是计检定时测量一次，故u(H)=s，即 紫外 标准不确定度分类一览表，见