Cronobacter+sakazkaii还原针铁矿的实验与研究.pdfVIP

增刊 q 拐学 报 Cronobacter 王浩然1，杨晓雪1，丁弦瑞1，李艳1，朱云2，鲁安怀” n女★{☆【jl$’iMR*m#A∞t^☆#≈№#々#目}lf十RJ七m10087I 2目女№Ⅱ女‰■acl·n．j匕女】0m37) 铁元素在地壳中含量丰富，常以多种氧化态 的形式?’泛存在。在缺氧或者厌氧的环境中．部 中按体机}匕I：10接种培养富集的QF菌液，空白 分微生物能够利用含铁矿物中的Fe(111)作为电子组不接种。实验组和空白组各设置2组平行，于 35℃，60 受体进行厌氧呼吸从而保证生命活动的正常进行 r／min培养。实骑过程中定期取充分摇 and 匀的悬浮液，使用改良考马斯亮蓝法(Tsaffrir (Lovley．1997)，具有这种能力的微生物被称作 _肄化Fe(III)还原菌。这类微生物在J天氧环境中极 物生物茸：使用邻菲罗啉分光光度法(James和 为常见，如地下水、海湾沉积物(Lovley等，2003)、 Chades，1998)测定总体系Fe(111浓度。 湖泊沉积物(Cu—ings等．2000)和底层上壤等。 奉实验研究的QF苗株分离自大从地层，经 实驰结束时取实验组悬浮液，经清洗、固定、 16s rDNA鉴定为阪崎克罗诺茼(Cronobacter脱水、临界点干燥和喷金后进行扫描电镜(SEM) sakazakff．NCBI髓录号JF690880)。以分离自地观察(崮1)。镜下针铁矿呈针状，无定向剞}列， 层的Cronobactersakazakii作为研究对蒙，考察其k 对氧化志铁的还原作用．对于探究自然界异化 长过程中分泌大量代谢产物包裹针铁矿，形成针 Fe(111)还原苗的分布及其生理特征有重要意义 铁矿与QF菌的共同体。 选择典型铁氧化物矿物——针铁矿作为研究 对象。制各方法为在180mL5moVL的KOH中 rnLl 迅速加入100 moFL的Fe(NOj)3溶液，充分 搅拌后用Dl水稀释定容至2L，在70℃下反应 60 h，3000 rain，收集沉淀(Schwertmann g离心15 andComell 2007)，沉淀洗涤3次后40℃烘干， 研磨过筛备用。经XRD箍定．制籍的针铁矿 (a．FeOOH)纯度达99％咀上。 L培养 实验使用五酸钠培养摹培养QF菌，l 基中舍：10．31Na2HPOal2H20-3．3l g g 图I扫描电镜观察QF苗Ⅱ原针铁矿 56 NaH2P0412H20，0．3IgNH4CI·013 gKCI，6 mL g无水乙酸钠和微量酵母提取物。反应器为30 分析总蛋白浓度随时间的变化(图2)，空白 庆氧管，其中溶液体积20mL，音0．0Ig针铁矿。 组悲蛋口浓度在实验周期内无增长．保持在O左 向溶液中通入高纯氮气上除溶解氧，保证严格赝 右。实验组QF苗在初期大量生长，总蛋白浓度快 氧环境。该条件下针铁矿足反应体系中微生物生 速增长。并在第4天达到2087m牡的最大值： 命活动的唯电子受体。经高温高压灭菌后，实 此后0F菌进入稳定生长期并逐