不同剂量γ射线照射对C57BL%2f6J小鼠肺成纤维细胞DNA损伤影响.pdfVIP

2Gy丫射线对小鼠Treg／Thl7免疫平衡的影响 杨晓云1’2，杜丽2，马琼：，蔡金玲1。：，肖凤君2，崔玉芳2 1中南大学基础医学院，长沙，410083：2军事医学科学院放射与辐射医学研究所，北京，l00850 节中发挥重要作用，而其在放射免疫损伤中的作用尚不明确。因此本文观察了2Gy丫射线照 射对小鼠mg厂rhl7免疫平衡的影响，期望能为辐射免疫损伤机制研究提供新的实验依据。 ‘方法：50只C57BL／6雄性小鼠(20士2g)随机分为对照组和照射组，照射组小鼠接受 60Co 1r射线一次性全身照射，吸收剂量为2Gy，对照组行假照射。于照射后1d、3d、7d、14d、 28d取外周血分别检测白细胞总数、淋巴细胞和红细胞计数的变化；取脾脏制备单细胞悬液， 用流式细胞仪检测7rreg和n17细胞的改变。 著性差异。(2)小鼠脾脏中CD4+CD25+Trcg细胞比例于照后ld即明显增高(P0．01)，照后 7d增至最高(P0．01)，为对照值的1．4倍，至照后28d与对照组相比无显著性差异；脾脏 的4-7倍，至照后28d与对照组相比无明显差异。(3)照射后由于Thl7比例的增高更为明 显，因而导致Treg厂rhl7比值在照后ld即明显降低，在照后3d降至最低，之后虽然逐渐恢 明显的向Thl7偏移的现象。 结论：C57BL，6小鼠经2GyY射线照射后，外周血细胞计数出现不同程度的降低，表明 2Gy丫射线照射即对小鼠免疫系统和功能造成一定程度的损伤。特别是照后7rreg与Thl7细 射所致免疫功能受抑和免疫调节功能失衡密切相关，该结果不仅为深入研究辐射免疫损伤机 制提供了新的依据，而且也为辐射免疫损伤治疗的靶向研究提供了重要启示。 不同剂量丫射线照射对C57BL／6J小鼠肺成纤维细胞 DNA损伤的影响 李杨王少霞杨蕾蕾徐新萍仲彤桂思倩 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京 100850 目的意义：放射性肺纤维化(RPF)见丁战时核辐射、平时核事故，也是胸部肿瘤放疗 和骨髓移植预处理常见而难治的并发症之 。C57BL／6J小鼠于1，射线照射后易发生I冲F， 肺成纤维细胞是RPF的主要效应细胞，其于射线照射后生物学行为的改变与鼬)F的发生发 171 展密切相关。DNA损伤是丫射线对细胞的主要损伤效应，单细胞凝胶电泳足细胞DNA损伤 的可靠检测方法，PH2AX是DNA双链断裂的标志物，因此．本研究通过单细胞凝胶电泳 和细胞中丫-H2AX表达的检测，旨在探讨不同剂量丫射线照射是否导致C57BL／6J小鼠肺成 纤维细胞的DNA损伤。 方法：原代分离培养C57BL／6J小鼠肺成纤维细胞，传至第3代，采用丫射线照射，照 细胞爬片固定后，采用免疫荧光组织化学法检测细胞中丫-H2Ax的表达，荧光显微镜观察， 每张爬片随机取10个视野，计数至少100个细胞中阳性细胞百分比，并根据此实验结果， 在上述照射剂量条件下，于照射后lh收集细胞进行单细胞凝胶电泳。每个实验均进行3次 生物学重复。 结果：1．丫．H2AX检测结果：丫-H2AX阳性信号位于细胞核，呈点状，散在分布于核内， 假照射组细胞偶见丫．H2AX阳性信号，且核内阳性信号少而表达弱，3和6G”射线照射后， 丫-H2AX阳性信号强且多，而12 Gy照射后阳性信号弱且少，其表达于照射后30mirI即出现， 表达高峰均出现于照射后lh，3个照射剂量细胞阳性率分别为(70．8士9．5)％、(86．5土7．2) ％和(72．5士6．7)％，照射后6h，3个剂量组细胞阳性率均低于7％，且阳性信号明显减弱减 少。2．单细胞凝胶电泳结果：0、3、6和12Gy丫射线照射后lh，假照射组偶见彗星细胞， 间无显著差异。 结论：3、6和12Gy丫射线照射可导致C57BL／6J小鼠肺成纤维细胞DNA损伤。 关键词：丫射线，DNA损伤，PH2Ax，单电泳细胞凝胶 甲3流感病毒裂解疫苗电镜观察 田光李豫川