热应激对小鼠胚胎附植影响机制及研究.pdfVIP

中目畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十六届学术研讨会论文集 热应激对小鼠胚胎附植影响机制的研究 刘琳1，钟友刚2，郭凯军1，曹永春1，田金灵1，史雅然1，刘风华1‘，高建明卜 (‘北京农学院动物科学技术学院北京102206；2中国农业大学动物医学院北京100049) 引言 许多资料显示，夏季高温会导致家畜繁殖力下降，目前有关热应激影响家畜繁殖性能 机理方面的研究，多集中于热应激对早期胚胎发育的影响【1。引，对胚胎附植期影响的研究鲜 有报道。附植是妊娠过程中至关重要的环节。探索高温对胚胎附植的影响机制，对提高夏季 高温条件下哺乳动物繁殖率具有重要意义。本研究模拟夏季高温环境对孕鼠的应激作用，探 讨热应激对昆明白小鼠胚胎附植影响的机制。 材料与方法 试验将9周龄孕鼠设为对照组(23℃a：2℃)和42℃应激组(小鼠妊娠1~4d，分别于每天 13：oo．15：00 42℃应激2h)，比较妊娠5d、6d、7dd,鼠胚胎着床数和产仔数以及观察其子 宫状况：HE染色观察子宫内膜和腺体的变化。免疫放射法测定小鼠妊娠4d血清中雌二醇(E2) 娠5d着床相关基因LIF、以及妊娠5d、6d、7dVEGF、COX．2、HOXa-10转录水平的表达变 化。免疫组化观察妊娠5d LIF、以及妊娠5d、6d、7dVEGF、COX．2蛋白的表达变化。 结果 应激组小鼠妊娠5d、6d、7d胚胎附植率、产仔数显著低于对照组(P0．05)；应激组相 比对照组其着床位点较少且分布失衡；HE染色应激组子宫内膜蜕膜细胞排列疏松，内膜腺 体数量有所减少，腺腔面积减小，与对照组相比差异显著(PO．05)。激素测定结果显示：应 达弱于对照组。R1：PCR结果显示：妊娠5d，应激组LIF、VEGF、HOXa．10mRNA表达显著 mRNA 表达显著升高(P0．05)，妊娠7d，两组无显著差异(P0．05)；免疫组化结果显示：妊娠5d， 强阳性，妊娠7d，两组表达基本一致。 讨论 胚胎附植也称植入或着床，是指处于活化状态的胚泡与处于接受状态的子宫相互作用， 最后导致胚胎滋养层与子宫内膜建立紧密联系的过程，受雌、孕激素和诸多细胞因子等的严 格调控。小鼠胚胎附植的时间在妊娠4．5d。本试验针对胚胎附植前母体遭受热应激后，从胚 胎着床、产仔率、组织形态、激素水平、蛋白水平、分子水平等方面，探讨了热应激对小鼠 胚胎附植的影响机制。试验结果表明胚胎附植前的热应激，显著影响着床前E2、P。水平及其 受体蛋白表达，进而影响附植开始后LIF、VEGF、COX．2、HOXaol0mRNA及其蛋白表达，最 终造成其胚胎附植、妊娠的障碍，繁殖力下降。 参考文献 N and incow．areviewof and E，First 【l】Memili L．Zygoticembryonicgeneexpression timing mechanisms as withother ofearlygeneexpressioncompared Roth PJ．Involvementof in of of Z，Hansen Competence 【2】2 ApoptosisDisruptionDeVelopmental Bovine HeatShock Oocytes by DuringMaturation[J]．BiolReprod，2004，71(6)：1898—1906． 【3】王小伟，田文儒，等．不同强度热应激预处理对胎鼠发育及组织SOD、GSH—PX活性和 MDA含量的研究【J】．上海畜牧兽医通讯，2010，l：14．15． 项目资助：北京市属高等学校人才强教计划资助项目，农业部公益性行业(农业)科研专项项目 (201003060-09／10) 第一作者：刘琳，在读硕士。钟友刚工作贡献等同于第一作者。 。通信作者：高建明，E-