苜蓿抗褐斑病基因ISSR标记的筛选及验证.pdfVIP

维普资讯 妞 扬伍力 第34卷第4期(2008) · 46 · PLANTPROTECTION Vo1．34No．4 (2008) 苜蓿抗褐斑病基因ISSR标记的筛选及验证 孟 芳 。， 袁庆华 ， 苏德荣 ， 高建 明。 (1．北京林业大学森林培育教育部重点实验室，北京 100083； 2．中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 ， 北京 100193； 3．天津农学 院，天津 300384) 摘要 运用ISSR分子标记技术和BSA法，对 四倍体紫花苜蓿(MedicagosativaL．)F 代进行抗褐斑病基 因连锁 的 分子标记筛选 。结果表 明，在 93个随机 引物 中，有 32个引物能够产生清晰稳定的扩增条带，其 中6个 引物在 中抗 杂交F 代、高抗、高感各 12单株所组成的抗、感DNA池间出现差异性条带。随后，对此6个标记进行单株检验 ，结 合均值差检验法，结果显示 20一R750与苜蓿褐斑病 的抗病基 因紧密连锁 ，11-$750与苜蓿褐斑病感病的基 因紧密连 锁 ，研究结果为紫花苜蓿抗褐斑病的鉴定和分子标记辅助抗病育种提供 了依据 。 关键词 苜蓿； 褐斑病； ISSR标记 ； 均值差检验法 中图分类号 S432．21。Q 78 SelectionandvalidationofISSR markersofcommonleafspot diseaseresistance-relatedgenein tetrapioidalfalfa MengFang ， YuanQinghua。， SuDerong， GaoJianming。 (1．KeyLaboratoryofForestBreedofBeijingForestryUniversity，Beijing 100083，China； 2．InstituteofAnimalSciences，CAAS，Beijing 100193，China； 3．TianjinAgriculturalCollege，Tianjin 300384，China) Abstract Inter—simplesequencerepeats(ISSR)wereemployedtodetectmolecularmarkerslinkedtotheresistance geneofcommonleafspotinF1ofthealfalfa(Medicagosativa)，accompaniedwithBSA．Theresultsshowedthat32 ofthe93ISSR primerstestedcouldamplifyclearandsteadybands，andintheF1ofmoderateresistance，therewas 6ISSR primersthatcouldamplifypolymorphicbandsbetweenresistantandsusceptibleDNA poolscomposedof12 highlyresistantplantsandhighly susceptibleplants．Subsequently，the6 ISSR markerswereverified in single plants，and20一R750wasfoundtobesignificantlyassociatedwith theresistanceinF1progenies，and 11-$750was foundtobesignificantlyassociatedwiththesusceptibility inF1progenies．Theseresultsarethebasisformolecular marker—assistedselectionandidentificationofdiseaseresistancevarieties． Keywords alfalfa；