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BCA 法微量蛋白质浓度测定试剂盒 产品编号：SK3061 产品简介： BCA 法是理想的蛋白质定量方法，在碱性环境下蛋白质与 Cu2+络合并将 Cu2+还原成 Cu1+。BCA 与 Cu1+结 合形成稳定的紫蓝色复合物，在 562 nM 处有最大的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。该 测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质去垢剂等影响小。本试剂 盒适用于微量蛋白质浓度的测定。若采用分光光度法，标准曲线的线性范围为 0.5-20 μg/ml 。若采用酶标板法，标 准曲线的线性范围为 2-40 μg/ml 。 产品特点： 1． 适用于浓度比较稀的蛋白质样品的定量。 2． 定量范围：分光光度法0.5-20μg/ml；酶标板法2-40μg/ml。 3． 与离子型或非离子型去污试剂兼容。 4． 检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马氏亮蓝。 运输和保存条件: 常温下运输,收到后,将试剂 A 、试剂B 和试剂 C 4℃保存，BSA 标准液-20℃，保质期一年。 产品组成： 本试剂盒由试剂 A 、试剂B 、试剂 C 和 BSA 标准溶液构成，分光光度法可以使用 250 次或酶标板法 1250 次。 1、 SK3061-1 试剂 A 60 ml 2 、 SK3061-2 试剂 B 60 ml 3、 SK3061-3 试剂 C 3ml 4 、 SK3061 BSA 标准溶液(5mg/ml) 2 ml 使用方法： 一、试剂准备： 1.1 按照以下公式计算所需的BCA工作液总体积。 BCA工作液总体积=（标准曲线测定点数+样品数）×重复次数×每个样品所需的BCA工作液体积 1.2 根据所需的BCA工作液总体积，取25份试剂 A 、24 份试剂 B 和 1 份试剂 C，混匀，制成BCA工作液。 1.3 取一试管，加入 40 μl BSA 标准溶液和 4.96ml 纯净水，配成 40 μg/ml 蛋白溶液。 1.4 取 9 支 1.5ml 离心管，按照下表平行操作。 管号 0 1 2 3 4 5 6 7 8 所加溶液 纯净水（μl） 1000 987.5 975 950 875 750 625 500 0 40 μg/ml 蛋白溶液（μl） 0 12.5 25 50 125 250 375 500 1000 蛋白质终浓度（μg/ml ） 0 0.5 1 2 5 10 15 20 40 二、分光光度法： 2.1 制作标准曲线（离心管法的蛋白定量线性范围：0.5-20 μg/ml ） 2.1.1 取 8 支 1.5ml 离心管，各管分别加入 500 μl 相应浓度的标准蛋白质溶液。 2.1.2 各管加入 500 μlBCA工作液，迅速混匀。 2.1.3 在60℃水浴中保温1小时。 地址: 上海市松江区香闵路 698 号 Add: 698 Xiang Min Road SongJiang Shanghai China 电话/Tel: 86-21 传真/Fax: 86-21技术支持/Support: 800-820-1016 400-821-0268 邮箱/Email: protein@ 网址/Web: 2.1.4 冷却至室温后，在分光光度计上测各管的 A562 值。 2.1.5 重复步骤2.2.1-2.1.4。 2.1.6 计算相同蛋白质浓度的两管 A562 值的平均值。 2.1.7 以各管A562 平均值为纵坐标，对应的蛋白质浓度为横坐标，在坐标纸上或Microsoft Excel软件中绘制标准 曲线。 2.2 未知样品蛋白质浓度测定 2.2.1 将样品做适当倍数的稀释或浓缩。 2.2.2 取三支 1.5ml 离心管，其中一管加入 500 μl 纯净水作为空白对照，另外两管分别加入浓度相同的500 μl 样 品稀释液或浓缩液。 2.2.3