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SPE方法开发和问题解决.pdf
泉岛公司色谱消耗品专家
SPE 方法开发和问题解决
非极性萃取过程
一般非极性萃取过程 常见问题解决-硅胶基质吸附剂
带有非极性官能团(芳香环、脂肪链)的化合物, 1. 保留不充分
均可使用非极性吸附剂(C18 、C8、CH、PH、CN-E)
从极性溶液(水、缓冲液)中进行萃取。 症状:在上样保留分析物阶段,就发生洗脱现象
典型的萃取应用包括: 解决方案
血浆或尿液中的药物
a. 增强基质环境的极性,如果样品在有机溶剂中,
水中的杀虫剂
将溶剂转为水或者缓冲液,以保证能正常保留。
血浆中的缩氨酸
b. 如果目标分析物是中性,将会更容易被保留。因
尿液或血清中的药物滥用监测
此,如果分析物带电,则可通过调节pH值来中和
分析物基团上的电荷。
1. 吸附剂的活化
c. 上样时,一定要确认柱床仍处于活化后的润湿状
先用一个柱管体积的甲醇,再用水或者缓冲液淋
态,如果活化后,真空仍然保留,时间超过 1min
洗柱床。
后,必须重新进行活化操作。
注意:在上样前不能让吸附剂干燥
d. 降低样品流速,可通过阀调节真空度,或者用SPE
的Luer 阀来控制柱流速,当所用吸附剂柱床小于
2. 上样
1g时,常用的样品流速为2-4ml/min。
关闭真空阀,将样品载入SPE柱,打开真空抽气,
使样品通过SPE柱。 2. 净化不彻底
症状:在分析过程中出现干扰峰或者假阳性
3. 淋洗,去除干扰物
解决方案
用水、缓冲液或者弱的溶剂混合物淋洗,去除一
部分基质干扰组分。 a. 用不同的混合溶剂和缓冲液进行选择性淋洗,去
除干扰物,而又不洗脱目标分析物。
4. 洗脱 b. 用不溶解目标分析物的溶剂淋洗。
将传输针头插入Vac Elut 真空装置,并放入贴上 c. 试用不同的非极性吸附剂。
标签的收集管,关闭真空,在柱管中加入洗脱溶 d. 试用其它选择性较强的保留机理,一般极性萃取
剂; 比非极性萃取有更强的选择性,离子交换比极性
打开真空,收集目标分析物。
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