Survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及与DNA倍体的相关性研究.pdfVIP

维普资讯 第 30卷 4期 宁夏医学院学报 2OO8年 8月 JournalofNingxiaMedicalCollege ·415 · 文章编号 ：1005一a406(2ooa)o4—0415—03 · 论著 · $urvivin在膀胱移行细胞癌中的表达及与DNA倍体的相关任研究 赵瑞宁 ， 陈福宝 ， 秦 璨 ， 杨芝红 ， 张宁妹。， 师宏斌 ， 余 洋 ， 卢冠军 (1．宁夏医学院附属医院泌尿外科，银川 750004； 2．宁夏医学院附属医院病理科，银川 750004； 3．宁夏医学院附属医院中心实验室，银川 750004) 摘要：目的 探讨Survivin表达和DNA倍体分析在膀胱移行细胞癌中的临床意义及相关性。方法 分别应用 免疫组化(sP)法和流式细胞术对60例膀胱移行细胞癌组织及 10例正常膀胱组织进行 Survivin蛋白检测和 DNA倍体分析。结果 (1)膀胱移行细胞癌中Survivin的阳性表达率和DNA异倍体率均明显高于正常膀胱组 织(P0．01)；(2)随着膀胱移行细胞癌病理分级、临床分期的增高，Survivin阳性表达率和DNA异倍体率均明 显升高(P0．05或 P0．01)；(3)在膀胱移行细胞癌 中，Survivin阳性表达率和DNA异倍体率呈正相关(P 0．01)。结论 Survivin阳性表达率和 DNA异倍体率与膀胱癌的发生、发展及预后密切相关。 关键词：膀胱肿瘤 ；Survivin；DNA倍体；免疫组化；流式细胞术 中图分类号：R737．14 文献标识码：A 肿瘤细胞与正常细胞的一个重要区别就是瘤细胞失去 10min，磷酸盐缓冲液 (PBS)冲洗，滴加一抗，室温下孵育 了节制性生长特性，而进入恶性生长状态。造成肿瘤细胞 60min，PBS冲洗，滴加聚合物增强剂，室温下孵育20min，滴 无限增殖的原因和机制非常复杂，细胞周期的失控是肿瘤 加酶标抗鼠／兔聚合物，室温下孵育30min，二氨基连苯胺 发生的重要原因之一，因此细胞周期调控已成为近年来研 (DAB)显色，苏木素复染，脱水，透明，封片，光镜下观察并 究的热门课题L1J。本研究应用免疫组化 (sP)法和流式细胞 摄片。以PBS代替一抗作为阴性对照；阳性对照片以福州 术分别检测60例膀胱移行细胞癌组织和 10例正常膀胱组 迈新生物技术开发有限公司所赠样片为准。 织标本中凋亡抑制基 因Survivin的表达和DNA倍体含量， 1．3．2 DNA倍体分析 采用流式细胞术 ，按试剂盒说明书 旨在探讨它们在膀胱移行细胞癌中的临床意义及相关性。 操作。将组织块剪碎，PBS液清洗，溶血素处理 ，离心后制 1 材料与方法 备成细胞悬液，调整细胞浓度 (1×106／mL)后，分别加入 cy． 1．1 一般资料 60例膀胱癌标本取 自宁夏医学院附属医 clerIKsTr~PLUSDNA试剂盒 中的A液、B液，用0．05％碘化 院泌尿外科2005年 9月至2O07年2月住院治疗的膀胱癌 丙啶染色后，上机检测进行 DNA倍体分析。 患者，临床资料完整。男4o例，女20例，年龄20～88岁，平 1．4 结果判定 均59．5岁。病理均为移行细胞癌 ，其中复发性膀胱癌 11 1．4．1 免疫组化法结果判定 Survivin以细胞浆及胞核着 例。病理分级I级21例，Ⅱ级 22例，Ⅲ级 17例。TNM分 色，有棕黄色颗粒物质沉积为阳性。参照 carcia[等评分 期Tis—Tl期24例 ，T2一T4期 36例。病理学指标均由病理 方法 ：根据免疫组化染色深度及阳性细胞数量分别计分 ，其 科资深医师确定。10例正常组织标本均取 自非膀胱肿瘤 中染色深度以多数细胞呈色反应为准。按染色强度将无 、 患者的膀胱组织。 弱、中、强、极强分别计0～4分；再按 阳性细胞 比例将 0、 1．2 试剂 兔抗人Survivin多克隆抗体、即用型第二代免疫 1％～2