RACE法在连翘花蕾全长cDNA文库构建中的应用.pdfVIP

·902 · 　山西医科大学学报 (J Shanxi M ed U n iv) 2009年 10月 , 40 ( 10) 　 文章编号 : 　1007 - 66 11 (2009) 10 - 0902 - 04 RACE法在连翘花蕾全长 cD NA 文库构建中的应用 1, 2 1, 2 2 2 1, 2 1 2 刘 　伟 , 　孙海峰 , 　郭小青 , 　张丽增 , 　秦雪梅 　( 山西大学化学化工学院 , 　太原 　030006; 　 山西 大学中医药现代研究中心 ; 　 通讯作者 , Tel: 035170 11202 , Em ail: qinxm @ sxu. edu. cn) TM 摘要 : 　目的　建立新的连翘花蕾全长 cDNA 文库构建方法 。　方法 　应用 GeneR acer 试剂盒 ,采用改 良 RNA 连接酶介导 ( ) 的快速扩增 cDNA 末端 RNA liga sem ediated rap id amp lication of cDNA end s, RLM RACE 技术构建连翘花蕾全长的 cDNA 文 库 ,通过计算菌落数 、蓝白斑数 、酶切鉴定 、序列分析等手段评价文库质量 。　结果 　通过增加模板用量的方法成功构建了连 5 翘花蕾全长 cDNA 文库 ,该文库容量为 3. 47 ×10 ,重组率为 81. 6% ,插入片段多集中在 500 - 1 000 bp 之间 ,所 占比例为 7 1% ;随机测序的 cDNA 克隆中均含有完整开放阅读框的全长 cDNA 序列 。　结论 　应用 RACE法成功构建了连翘花蕾全长 cDNA 文库 。 关键词 : 　连翘 ; 　全长 cDNA 文库 ; 　构建 ; 　RACE 中图分类号 : 　R284　　　文献标识码 : 　A A pplica tion of RACE m ethod on the con struction of fulllen gth cD NA library for flora l bud s in F o rsyth ia su spen se 1, 2 1, 2 2 2 1, 2 (1 L IU W ei , SUN H aifeng , GUO X iaoqing , ZHAN G L izeng , Q IN Xuem ei Colleg e of Chem is try and Chem ica l E ng ineer 2 ing, S hanx i Un ivers ity, Ta iy uan 030006, Ch ina; M odern R esea rch Cen ter f or Trad itiona l Ch inese M ed icine, S hanx i Un ivers ity; Corresp ond ing au thor,