丹参脂溶性成分的研究.docVIP

丹参脂溶性成分的研究 081463116 马春旭 孝感学院 摘要 目的：研究从丹参中提取脂溶性成分的最佳工艺条件。方法：采用丹参酮ⅡA和醇浸出物作指标，通过实验筛选。 中药丹参中的脂溶性成份丹参酮类化合物是丹参活血化瘀的有效成份之一。其在水中溶解度极小, 不能用水煎煮提取, 为了设计出合理的提取工艺, 保证药物的疗效, 采用正交设计, 以丹参酮 IIA和醇浸出物作指标, 通过实验筛选出了最佳提取工艺条件。 1 仪器与试药 Waters2695 高效液相色谱仪 ( 美国 Waters 公司) , 色谱柱: Symmetry shield Rpl8 ( 3.9× 150mm,5μ m) 、 AG- 135 电子天平( 瑞士 0.01mg ) 、 AL204 电子天平 ( 梅特勒- 托利多仪器有限公司 0.1mg ) , 甲醇( 色谱纯) 、 乙醇 ( 分析纯) 。 2 方法与结果[1- 2] 2.1 试验方法 采用正交试验法对乙醇浓度、 乙醇用量、 提取时间进行考察, 以丹参酮ⅡA、 醇浸出物为指标综合评价 ( 权重系数为 0.8∶ 0.2) , 筛选最佳提取条件。综合评分公式: ( 丹参酮ⅡA 峰面积/最大丹参酮ⅡA 峰面积) × 0.8+ ( 醇浸出物量/最大醇浸出物量) × 0.2。 2.2 测定波长的选择 丹参酮 IIA标准品甲醇溶液与丹参的乙醇提取液在 270nm处均有最大吸收, 故选择 270nm作为检测波长。 2.3 色谱条件 色谱柱: Symmetry shield Rpl8 ( 3.9× 150mm,5μ m) ; 流动相: ( 甲醇∶ 水=75∶ 25) ; 流速: 1mL/min; 检测波长: 270nm; 柱温 ( 30± 5) ℃; 进样量: 10μ L。 2.4 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA 对照品 1.0mg 置于 10mL容量瓶, 以甲醇溶解并稀释至刻度, 摇匀, 得到浓度为 0.1mg/mL丹参酮ⅡA对照品溶液, 备用。 2.5 供试品溶液的制备 将丹参适当捣碎, 过筛, 称取 15g,按照实验安排分别用不同浓度的乙醇, 以不同倍数, 不同次数,不同煎煮时间来提取样品, 合并提取液于 500mL容量瓶中, 加相应浓度的乙醇定容, 摇匀, 即得丹参样品液, 取上清液用微孔滤膜 ( 0.45μ m) 滤过, 弃去初滤液, 取续滤液作为供试品。 2.6 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ L, 注入液相色谱仪测定, 即得。 2.7 丹参酮ⅡA 标准曲线的绘制 精密称取丹参酮ⅡA 标准品 1g 置于 10mL 量瓶中, 用甲醇稀释至刻度, 使浓度为 0.1g/mL, 分别吸取 3、 5、 7、 9、 12μ L, 使其质量分别为 0.3、 0.5、 0.7、0.9、 1.2μ g, 以甲醇作空白, 用 HPLC 于波长 270nm处测定吸收蜂, 所测结果经回归后的回归方程为:Y=5.51e+006X- 8.88e+004, r=0.9999。由此可知, 丹参酮ⅡA在 0.3~1.2μ g范围内呈线性关系, 结果见表 1。 表 1 标准曲线数据 2.8 醇浸出物的测定 测定方法: 吸取丹参样品液 50mL置于已称重( 记为 M1) 并记录过的坩埚中, 置于水浴上加热, 将醇溶液挥干样品呈固体状即可, 称重, 记为 M2。计算公式: ( M2-M1) /1.5× 100%。 2.9 正交试验 按处方称取丹参 15g, 共 18 份, 按正交条件进行试验, 滤液定容至 500mL, 每个试验重复两次, 分别测定两个考察指标, 求平均值, 结果见表 2、 3、 4。含量 ( μ g ) 0.3 0.5 0.7 0.9 1.2 A 1599401 2626487 3780658 4848057 6547491 丹参脂溶性成份提取工艺研究 姜 林,周冬梅 ( 新疆医科大学附属中医医院,新疆 乌鲁木齐 830000) 摘 要 目的: 优选丹参脂溶性成份最佳提取工艺条件。方法: 采用正交设计, 以丹参酮ⅡA和醇浸出物作指 标, 通过实验筛选。结果: 最佳提取工艺条件为加 12 倍量 70%乙醇, 提取两次, 每次 0.25h。结论: 该提取工艺合理可 行, 适用于大生产。 关键词 丹参 / 脂溶性成份; 提取 46新疆中医药 2008 年 第 26 卷 第 1 期 ( 总第 113 期) 表 2 因素水平表 表 3 L9 ( 34 ) 正交试验表 表 4 方差分析表 经直观分析可知: 影响提取效果的因素为: C ( 乙醇浓度) A ( 提取时间) B ( 乙醇用量) , 以乙醇浓 度影响最大