不同内皮细胞条件培养液对皮层神经元线粒体功能的影响及通络救脑注射液的保护作用.pdfVIP

中国中西医结合杂志2007年2月箜 !鲞箜 塑 ! ! !! !：!! ： 131 · · 实验 研 究 · 不同内皮细胞条件培养液对皮层神经元线粒体 功能的影响及通络救脑注射液的保护作用 李卫红 李澎涛 华 茜 洪庆涛 胡京红 摘要 目的 探讨脑微血管 内皮细胞条件培养液对损伤神经元线粒体功 能的影响，以及通络救脑注射 液对此过程的干预作用。方法 制备 (1)正常 内皮细胞条件培养液 (N—CM)：正常培养的内皮细胞不作任何 处理 ；(2)正常用药内皮细胞条件培养液(NT—CM)：通络救脑注射液按 1tA／ml浓度作用 10h；(3)缺氧损伤 内皮细胞条件培养液(I-CM)；(4)缺氧损伤用药 内皮细胞条件培养液(IT—CM)：于损伤前4h，加入通络救脑 注射液 1~l／ml；分别作 用 于糖 氧剥 夺损伤 的神 经元模 型 ，通过 测 定神 经 元线 粒体 活性、线粒 体膜 电位 (MMP)及细胞色素 C(CytC)，分析各个条件培养液对损伤神经元线粒体功能的影响。结果 (1)与模型组 比较，N—CM 组与 NT—CM 组 (P0．05)均可阻抑损 伤神 经元线粒体 活性的下降，尤其是 NT—CM 保护作 用 更为明显。(2)与正常组比较 ，模型组 MMP明显下降；I-CM 使受损神经元的线粒体功能进 一步下降；I—CM 组可进一步降低受损神经元MMP，IT—CM 可逆转神经元 MMP下降，明显改善这种损伤状态 。(3)N—CM 组 与NT—CM 组均可降低损伤神经元的CytC释放 ，分别与模型组 、I-CM 组 比较 ，差异均有显著性 (P0．05)。 结论 脑微血管内皮细胞的旁分泌功能对损伤神经元的存活有重要的调节作用，该作用的实现可能与维持 神经元线粒体功能有关，通络救脑注射液可促进该作用的发挥 。 关键词 脑微血管 内皮细胞 ；皮层神经元；线粒体 ；通络救脑注射液 InfluenceofDifferentEndothelialCellsConditionedM edium ontheFunction ofM itochondriaofCorticalNeu． ronsandtheProtectiveEffectofTongluoJiunaoInjectionLIWei—hong，LIPeng—tao，HUAQJan，etalCol— legeofTheoreticalMedicine，BeijingUniversityof ChineseMedicine，Beijing (100029) Abstract Objective Tostudytheinfluenceofconditionedmedium ofratbrainmicrovascularendothelial cellsonmitochondrialfunctionofcorticalneuronsandtheprotectiveeffectofTongluoJiunaoInjection(TJI)on it．Methods Fourkindsofconditionedendothelialcell(EC)culturedmedium wereprepared．i．e．theN—CM medium preparedbyEC cultured in thenormalconditionedmedium withoutanytreatment；theNT—CM pre- paredbyECculturedinN—CM andtreatedwithTJI1tA ／mlfor10h；theI-CM preparedbyECcuhuredinthe non—glucosekrebmedium underhypoxiacondition；andtheIT—CM byECpre—treatedwithTJI1ul／mlfor4h andculturedasthatofI-CM ．Thelevelsofneuronicmitochondrialactivity， membranepotential(MMP)and cytochromeC (CytC)weredeterminedbeforeandaftertheglucose—oxygendeprivedmodelneuronsofbraincor— t