人血管平滑肌细胞的原代培养及其钙化模型的建立.pdfVIP

2010 2 34 1 BullAcadM ilM ed Sci, V ol34, No 1, Feb, 2010 37 1, 2# 2 1 2 , , , [ ] 利用 B-甘油磷酸盐处理人血管平滑肌细胞( hum a vascu lar sm ooth m uscle cells, HVSM Cs )制备体 外血管钙化模型 用组织贴壁法从人 胎脐带动脉中分离原代人主动脉平滑肌细胞, 原代细胞通过抗体 A- sm-acti 染色鉴定, 将传 4 ~ 6代的细胞分为钙化组和对照组, 对照组用正常 DMEM 培养基培养, 钙化组加入 10 mm ol/L B-甘油磷酸盐诱导细胞钙化, 连续培养 10 d茜素红 S染色及碱性磷酸酶法鉴定:分离的原代细 胞经 S-P染色鉴定为阳性, 呈淡黄色钙化组细胞诱导钙化后, 细胞增殖缓慢, 并形成囊泡结构, 茜素红S染色形成 红色的钙化结节, 钙化组碱性磷酸酶活性较对照组在不同时间点( 4,