RT_PCR一步法与RT_PCR两步法的比较.pdfVIP

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RT_PCR一步法与RT_PCR两步法的比较.pdf

100 2003 10 37 - - RT PCR RT PCR 陈余朋, 张 声, 陈林莺, 陈 瑜, 张真真 : ; : 394: : 1672-4194( 2003) 0-0100-03 R B S - 3000 ( - ) ; RT PCR RN A T M Bio Ra d , RT -PCR mR N A ( M illipak 40 , M illipo e ) ; cDN A , cDN A PCR Buffe ( 30916 , Zieg g a ) ; ( GelDO C- , , 1000 , - ) cDN A P CR Bio Rad RT -P CR: AM V M -M ulv T thDN A 2 cDN A , cDN A PCR RT -PCR RT -P CR , RT -P CR 2. 1RN A : , , , , RN A 2. 1. 150 mg , , , , PCR RT - T izo l 1 mL PCR : , 2. 1. 2 R NA 1. 5 m L Eppendof ; RN A cDN A , ; , 20 5 min, 200 mL , 15 s, 3 min, 4 15000 / min 15 min : - 1 1. 1 200 1-2002 2. 1. 3R NA Eppend- 69 , 4 1 , 28 of , 0 . 5 mL , 0 . 5 mL , , , , 10 min, 4 15000 / min 10 min, , , ( , : 1640) , - 80 2. 1. 4 RN A 75% ( T izol 1 mL 1. 2 - ( 1 mL) , 4 , 10000 / min 5 min, RT PCR T izol RN A GiBCO - BR L ) ; T it an o ne tube RT -PCR system ( 2. 1. 5 RN A 510 min, ) ; T aq ( P om ega ) ; Reve taidT M Fi st St and Rnase , , 5560 10 min, RN A ( ) ; 10 / , - 86

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