克百威免疫亲合色谱技术研究.pdfVIP

!# 年$ 月 色 谱 !#$ !$ %$ ! %’() !# !#$%% ’()*$+, (- !*(.+/(0*+1 2 *$+ , *$- 克百威的免疫亲和色谱分析研究 刘曙照， 韦林洪， 徐维娜 （扬州大学环境科学与工程学院，江苏 扬州 !!#3 ） ’()*+,-( ./0+ 1 经碳酰二咪唑（.23 ）活化后与纯化的克百威抗体共价偶联，合成了免疫亲和色谱（34 . ）固 摘要： 定相，并用其制备了对克百威具有特异性亲和力的34 . 柱。对34 . 条件进行了优化，选择A ! 5#6 / )7 -A ! 磷酸 盐缓冲液（81 ）作为吸附与平衡介质，B9 （体积分数）甲醇水溶液作为洗脱剂。结果表明：在优化条件下，34 . 柱 对克百威的动态柱容量达 *A #/ 5:6 / 。当标样溶液中克百威质量浓度低于 ! !:6 / 时，经 34 . 柱富集的效率高于 *B- 倍。在河水中按A * 5:6 / 水平添加克百威标准品，经 34 . 柱分离富集，洗脱液采用包被抗体直接竞争酶联免 疫吸附分析（;/3’4 ）法检测，# 次重复测定的平均回收率为 /3A /9 ，相对标准偏差为+A /9 。同时采用高效液相色 谱（78/. ）法测定洗脱液，与 ;/3’4 法测定结果基本一致。 关键词：免疫亲和色谱；酶联免疫吸附分析；高效液相色谱；克百威 B#/C C C 文献标识码：4 文章编号：*0/- *$ （!# ）!0 *$+ 0+ 中图分类号： !#$%’ () *++#)(,--%)%. /01(+,(21,30. -(1 /,14(-#1,) /3= ’*?*+ ，@;3 /AB*B: ，C= @(AB+ （!##$% $ ’()*+(, $( -.# /0*$(0$ .(1 ’(%*($$+*(% ，2.(%345 6(*)$+7*-8 ，2.(%345 !!##$ ，!4*(. ） 54’1,6 ：D*( ),AEA(F +BGA0 H+,IE,+B +BGAIFJ K+- HBL :+G(F G H+,IBJ# FAA5AF+?#( （.23 ）0 +HGAM+G(F ’()*+,-( ./0+ 1 G -JBG*(-A?( G*( A55B-,I(BG E, G*( A55B+EEABAGJ H*,5+G:,+)*AH （34 . ）H#5B -)(HAEAH G H+,IE,+B $ D*( HBFAGAB- E 34 . K(,( )GA5A?(F +- E##K- ：)7 -A ! )*-)*+G( IEE(, （81 ）K+- -(F +- (NA#AI,A5 +BF +F-,I(BG 5(FA5 ，+BF 5(G*+B#0K+G(, （B D + ，M6 M ）+- (#(BG $ D*( ,(-#G- -*K(F G*+G G*( FJB+5AH H#5B H+)+HAGJ K+- ) G *A #/ 5:6 / I(F M#5($ D*( (EEAHA(BHJ E (B,AH*5(BG E 34 . K+- 5,( G*+B *B- GA5(- K*(B G*( ABAGA+# HBH(BG,+GAB E H+,IE,+B AB + -G+BF+,F -+5)#( -#GAB K+- #K(, G*+B ! !:6 / $ D*( -)AO(F ,AM(, K+G(, K+- H#(+B(F ) +BF (B,AH*(F IJ 34 . ，+BF H+,IE,+B AB (#+G( K+- F(G(,5AB(F IJ (B?J5( #ABO(F